[發(fā)明專利]試紙條、試劑盒以及測(cè)定糖化血紅蛋白的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911330715.2
• 申請(qǐng)日: 2019-12-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110967488B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 艾峰;許定
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳優(yōu)迪生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/66
• 分類號(hào): G01N33/66
• 代理公司: 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 張立

本發(fā)明提供了一種試紙條、試劑盒以及測(cè)定糖化血紅蛋白的方法。該試紙條包括：底板，底板上設(shè)置有至少一個(gè)檢測(cè)孔；層析膜，層析膜位于底板上，且經(jīng)過(guò)所述檢測(cè)孔，至少部分所述層析膜修飾有硼酸基團(tuán)；吸水紙，吸水紙位于所述底板上，所述吸水紙的一端與所述層析膜的一端接觸；擋板，擋板設(shè)置于所述層析膜上，且所述擋板與所述檢測(cè)孔對(duì)應(yīng)設(shè)置；和防水紙，防水紙?jiān)O(shè)置在所述吸水紙的上表面。所提供的試劑盒包括該試紙條。應(yīng)用該試紙條或試劑盒，可以實(shí)現(xiàn)糖化血紅蛋白的快速測(cè)定。該測(cè)定方法具有樣本需求量極低，結(jié)果準(zhǔn)確，穩(wěn)定性好，操作簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)，不僅滿足臨床診斷和POCT，也適用于廣大群眾使用，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于體外診斷領(lǐng)域，涉及一種試紙條、試劑盒以及測(cè)定糖化血紅蛋白的方法。

背景技術(shù)

在上世紀(jì)90年代，英美等西方國(guó)家便對(duì)糖尿病進(jìn)行了大規(guī)模臨床病理和生理學(xué)的研究，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)糖尿病并發(fā)癥的減少和糖化血紅蛋白(HbA1c)占總血紅蛋白(Hb)百分比的降低有關(guān)。HbA1c不僅可以反映血糖控制、治療達(dá)標(biāo)等指標(biāo)，它也在糖尿病預(yù)測(cè)、診斷、愈后判定上有重要的價(jià)值。與空腹血糖(FPG)和空腹葡萄糖耐量測(cè)試(OGTT)相比，HbA1c有幾個(gè)優(yōu)勢(shì)：(1)方便；(2)更好的預(yù)分析穩(wěn)定性；(3)抗干擾性能。HbA1c能準(zhǔn)確反應(yīng)患者長(zhǎng)期的血糖控制水平，也是監(jiān)測(cè)糖尿病發(fā)展的重要指標(biāo)。準(zhǔn)確的HbA1c檢測(cè)方法將簡(jiǎn)化糖尿病診斷過(guò)程，并在一定程度上實(shí)現(xiàn)糖尿病的早期診斷。

目前，臨床和實(shí)驗(yàn)室使用的HbA1c測(cè)定方法有很多種，大體可以基于原理分為兩種類型:(1)基于HbA1c和非糖化血紅蛋白的電荷不同，主要方法有離子交換法和電泳法；(2)基于HbA1c和非糖化血紅蛋白的結(jié)構(gòu)不同，這種結(jié)構(gòu)不同主要來(lái)自于糖基化位點(diǎn)，主要方法有免疫法和親和層析法。液相色譜法是目前國(guó)際所公認(rèn)的HbA1c測(cè)定方法，臨床上也大量使用。這種方法雖然較為穩(wěn)定、有參考價(jià)值且線性度好，但此法的缺點(diǎn)是設(shè)備昂貴，儀器巨大，且需要專業(yè)的操作人員操作，檢測(cè)費(fèi)時(shí)長(zhǎng)，不利于廣泛使用。電泳法利用不同電荷的血紅蛋白樣本在電泳凝膠上遷移速度不同的原理測(cè)定HbA1c。由于電泳法操作復(fù)雜，得到結(jié)果時(shí)間長(zhǎng)，現(xiàn)在該方法已很少應(yīng)用于臨床。免疫法基于抗體和抗原特異性結(jié)合的原理，其中，側(cè)向免疫層析試紙，以熒光量子點(diǎn)/熒光微球/金納米顆粒為信號(hào)載體，以檢測(cè)線和質(zhì)控線的信號(hào)為檢測(cè)結(jié)果，適合有快速診斷需求的科室和家庭，但該方法線性范圍小、易受血紅蛋白變異體和HbA1c前體的干擾，應(yīng)用受到巨大限制。親和層析法基于硼酸基團(tuán)對(duì)多羥基類物質(zhì)的吸附能力，親和層析柱中的硼酸基團(tuán)首先與HbA1c糖基化位點(diǎn)的順位二醇結(jié)合，接著從柱子中流出的部分為非糖化的血紅蛋白(用紫外-可見(jiàn)吸收光譜判斷濃度)，再用Tris、甘露醇、山梨醇等多羥基類物質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)并洗脫柱子上的HbA1c，最后從柱子中流出的部分為HbA1c。親和層析柱法測(cè)定HbA1c在臨床上也有所普及，親和層析柱法不受諸多血紅蛋白變異體的影響。HbA1c前體的存在對(duì)其所測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯影響，血樣無(wú)需預(yù)處理去除HbA1c前體。但目前親和層析柱法的填料昂貴、操作復(fù)雜并且得到結(jié)果所需要的時(shí)間較長(zhǎng)。

針對(duì)HbA1c檢測(cè)的方法學(xué)研究已經(jīng)有很多年，但仍需進(jìn)一步改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問(wèn)題之一。為此，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提出一種試紙條、試劑盒以及測(cè)定糖化血紅蛋白的方法。應(yīng)用該試劑條、試劑盒可以實(shí)現(xiàn)糖化血紅蛋白的快速檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果既滿足HbA1c檢測(cè)的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，又突破現(xiàn)有方法的局限，可以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確度、線性范圍、床旁檢測(cè)(point-of-care?testing，POCT)、廉價(jià)、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)耗時(shí)短，微量樣本等方面的需求。

具體而言，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

根據(jù)本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提供了一種試紙條，包括：

底板，所述底板上設(shè)置有至少一個(gè)檢測(cè)孔；

層析膜，所述層析膜位于所述底板上，且經(jīng)過(guò)所述檢測(cè)孔，至少部分所述層析膜修飾有硼酸基團(tuán)；