[發(fā)明專利]固定化蛋白質(zhì)及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911330175.8
• 申請日: 2015-01-30
• 公開（公告）號: CN110951720B
• 公開（公告）日: 2023-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 卡里姆·恩格爾馬克·卡西姆吉;揚(yáng)-埃爾林·貝克瓦爾
• 申請（專利權(quán)）人: 恩制因塞米公司
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N11/082;C12N11/087
• 代理公司: 北京康信知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11240
• 代理人: 張曉影

1.一種用于催化酶催化的反應(yīng)的方法，包括

(a)提供載體和固定在所述載體上的至少一種酶，

其中所述載體包含附接有親和基質(zhì)的載體材料，所述親和基質(zhì)含有螯合的金屬離子，所述載體材料選自由以下組成的組：

i)控制孔隙度玻璃；

ii)混合控制孔隙度玻璃；和

iii)多孔有機(jī)聚合物；并且

其中，所述至少一種酶含有聚組氨酸標(biāo)記物并且通過所述聚組氨酸標(biāo)記物與所述螯合的金屬離子之間的特異性親和結(jié)合被固定在所述載體上；以及

(b)使固定的酶與至少一種底物接觸，從而催化所述反應(yīng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述親和基質(zhì)通過連接基附接到所述載體的表面。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述載體材料是控制孔隙度玻璃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述載體材料是混合控制孔隙度玻璃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述載體材料是選自由聚乙烯、超高分子量聚乙烯、高密度聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、聚偏二氟乙烯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸酯和聚(甲基丙烯酸甲酯)組成的組的多孔有機(jī)聚合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述多孔有機(jī)聚合物是聚苯乙烯。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述多孔有機(jī)聚合物是聚甲基丙烯酸酯。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述多孔有機(jī)聚合物以具有有限溶脹的多孔顆粒存在。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述螯合的金屬離子選自由Fe²⁺、Fe³⁺、Co²⁺、Ni²⁺、Cu²⁺和Zn²⁺組成的組。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，將兩種或更多種不同的酶固定到所述載體上，其中不同的酶中的每種能夠催化不同的反應(yīng)。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述載體另外包含金屬納米顆粒。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中，所述金屬納米顆粒是過渡金屬的納米顆粒。

13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中，所述金屬納米顆粒選自由鈷、鎳或鈀納米顆粒組成的組。

14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述酶催化的反應(yīng)在含水條件下進(jìn)行。

15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述酶催化的反應(yīng)在有機(jī)溶劑中進(jìn)行。

16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述酶催化的反應(yīng)是連續(xù)流反應(yīng)。

17.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中，所述酶催化的反應(yīng)是級聯(lián)反應(yīng)。

18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中，將第一酶的底物轉(zhuǎn)化成第二酶的底物。

19.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中，通過第一酶轉(zhuǎn)化底物并且其中由第二酶再生用于第一酶的輔因子。

20.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中過渡金屬固定在所述載體上，并且其中所述方法是包括酶催化的反應(yīng)和過渡金屬催化的反應(yīng)的多步反應(yīng)。