[發明專利]一種快速檢測果酒中組胺含量的方法

在審

• 申請號: 201911318248.1
• 申請日: 2019-12-19
• 公開（公告）號: CN110850005A
• 公開（公告）日: 2020-02-28
• 發明（設計）人: 潘勇
• 申請（專利權）人: 常州磐諾儀器有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京華際知識產權代理有限公司 11676
• 代理人: 葉玉鳳

本發明公開了一種快速檢測果酒中組胺含量的方法，現如今，在檢測果酒中含有的組胺含量時，一般選擇采用酶聯免疫法、氣相色譜法、高效液相色譜法和毛細管電泳色譜法，不僅操作過程復雜，價格高，操作難度大，而且檢測靈敏度較低；針對這個技術問題，我們設計了一種快速檢測果酒中組胺含量的方法，利用熒光分析法來檢測果酒中含有的組胺的含量；但由于組胺沒有熒光發色基團，不具有熒光性，為了保證熒光分析法的順利進行，我們對組胺進行前處理，利用丹磺酰氯溶液與組胺上的活潑氫反應，生成具有熒光的組胺?丹磺酰氯衍生物，再利用具有熒光的組胺?丹磺酰氯衍生物的檢測來檢測果酒中的組胺含量，具有較高的實用性。

技術領域

本發明涉及分析檢測技術領域，具體是一種快速檢測果酒中組胺含量的方法。

背景技術

組胺(Histamine)是組氨酸在組胺脫羧酶催化作用下形成的單胺類物質。在人體中，組胺可以進行多種生理反應，它不僅是炎癥反應和免疫損傷的重要介質之一，而且還有降壓作用，對腫瘤治療也有一定的促進作用。目前檢測組胺的常用方法有酶聯免疫法、氣相色譜法、高效液相色譜法、毛細管電泳色譜法等。

酶聯免疫法是用酶-底物反應來檢測的，所用的酶需有產生易測定的有色或熒光物質。酶偶聯物的量由其合適的底物顏色變化決定的，該方法不能同時分析多種成分，對結構類似的化合物有一定交叉反應，對結果判定有一定影響。

氣相色譜法利用物質的揮發性進行分離檢測，此方法雖然能夠準確定量，但是樣品前處理復雜，必須進行衍生化反應使其揮發性增加，檢測的難度大。另外，測定成本過高，限制了該方法的推廣使用。

高效液相色譜法采用高壓輸出的液體為流動相，以小粒徑填料為固定相。同時，在柱后有高靈敏度檢測器，從而實現對樣品的連續分析，有良好的特異性和靈敏性，但是前處理過程復雜，儀器耗材十分昂貴。

毛細管電泳色譜法結合了高效液相色譜法的高選擇性、毛細管電泳法的高效性進行組胺的檢測，分離速度快，無環境污染，但是檢測靈敏度較低。

針對上述問題，我們需要設計一種快速檢測果酒中組胺含量的方法，這是我們亟待解決的問題之一。

發明內容

本發明的目的在于提供一種快速檢測果酒中組胺含量的方法，以解決現有技術中的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種快速檢測果酒中組胺含量的方法，包括以下步驟：

1)準備物料；

2)取果酒，加入丹磺酰氯溶液，生成組胺-丹磺酰氯衍生物；

3)進行熒光檢測，得到組胺含量。

較優化的方案，包括以下步驟：

1)準備物料：

2)取步驟1)準備的丹磺酰氯，以丙酮溶解，制備得到丹磺酰氯溶液；

3)取步驟1)準備的果酒，加入2mol/L的NaOH溶液，攪拌，再加入飽和NaHCO₃溶液，調節pH；

4)再在果酒中添加步驟1)制備的丹磺酰氯溶液，置于水浴中加熱，反應生成組胺-丹磺酰氯衍生物；

5)再在果酒中添加0.1mL氨水中斷反應，除去殘留的丹磺酰氯，用0.45μm的有機膜過濾除去果酒中的雜質；

6)將步驟5)處理后的果酒置于熒光光譜儀下進行熒光檢測，計算，得到組胺含量數據。

較優化的方案，包括以下步驟：

1)準備物料：步驟1)中進行物料的準備，便于操作人員進行后續試驗；