[發明專利]一種金線蓮原球莖仿野生培育種苗的方法

有效

• 申請號: 201911318237.3
• 申請日: 2019-12-19
• 公開（公告）號: CN110754367B
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 石云平;許娟;廉永銘;邱展鴻;蘇祖祥;韋紹龍
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院;廣西華泰藥業有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G22/00;A01G24/20;A01G24/10
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

1.一種金線蓮原球莖仿野生培育種苗的方法，包括以下步驟：

（1）金線蓮成熟蒴果無菌播種：將成熟蒴果在天晴日采摘回來，在超凈工作臺上，用75%乙醇滅菌30 s，無菌水沖洗1次，用無菌紙吸干蒴果表面水分；再用0.1%升汞滅菌10 min，無菌水沖洗5次，用無菌紙吸干蒴果表面水分；橫切開蒴果一端，將種子播種于初代培養基上，暗培養5天后，進行光培養，15～20天后種子吸水變圓變綠；30～45天萌發形成原球莖，種子萌發率為53.7%～88.5%；

所述的初代培養基為MS+6-BA0.5～2.0 mg/L+GA0.1～1.0 mg/L+NAA0.1～0.5 mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+瓊脂4 g/L；

（2）原球莖增殖培養：將步驟（1）得到的原球莖團切分成小團接入增殖培養基中培養，10天后原球莖開始增殖，30天后統計增殖系數，為1.8～4.1；

所述的原球莖增殖培養基為MS+CPPU0.05～0.5 mg/L+TDZ0.1～1.0 mg/L+NAA0.1～0.5 mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+瓊脂4 g/L；

所述增殖培養條件是：溫度為25±3℃, 光照時間為6 h/天, 光照強度為500 lx；

（3）金線蓮原球莖仿野生培育種苗：

（3.1）林地選取和育苗基質準備：林地的郁閉度90%，地面鋪上一層1 cm厚的基質，基質按羊糞10～30%、牛糞10～40%、黃土30～80%比例粉碎混合均勻，在撒播原球莖的前兩天噴淋水，備用；

（3.2）在4月～6月份期間，將步驟（2）得到原球莖取出，洗凈培養基，撒播到林地的基質上，蓋上一層厚度為0.5 cm的樹葉，用薄膜做成一個個拱棚，拱棚內的濕度為80%，15～25天后，原球莖上開始長出小芽，25～30 天后小芽基部突起，30～40 天后開始長根，50～65天長成有2～3條根和2～3片葉的小苗，小苗的成活率61.3%～92.6%。

2.根據權利要求1所述的金線蓮原球莖仿野生培育種苗的方法，其特征在于：

步驟（1）所述的初代培養基為MS+6-BA1.0 mg/L+GA0.5 mg/L+NAA0.3mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+瓊脂4 g/L；

步驟（2）所述的原球莖增殖培養基為MS+CPPU0.2 mg/L+TDZ0.4 mg/L+NAA0.3mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+瓊脂4 g/L。