[發(fā)明專利]氨基酸的高效綠色制造工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911317193.2
• 申請日: 2019-12-19
• 公開（公告）號: CN110904169B
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發(fā)明（設計）人: 季新利;楊雪;王小平;劉元濤;李樹標
• 申請（專利權）人: 呼倫貝爾東北阜豐生物科技有限公司
• 主分類號: C12P13/18
• 分類號: C12P13/18;C12N1/20;C12N1/38;C12R1/13
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1. 谷氨酸的高效綠色制造方法，其包括如下步驟：

步驟1）制備優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基

所述優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基包括分開使用的發(fā)酵培養(yǎng)基A和發(fā)酵培養(yǎng)基B；

所述發(fā)酵培養(yǎng)基A按照如下方法制得：葡萄糖50-100g/L，酵母浸膏10-30g/L，K₂HPO₄ 1-5g/L，MgSO₄·7H₂O 20-200mg/L，2-羥基乙胺10-50mg/L，CeCl₃1-20mg/L，MnSO₄·H₂O 1-10mg/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 1-10mg/L，VB₁ 5-50mg/L，生物素1-10μg/L；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)pH為6-7，121℃滅菌，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基A；

所述發(fā)酵培養(yǎng)基B按照如下方法制得：

取琥珀酸1-10g/L，尿素1-5g/L，殼聚糖20-100mg/L；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)pH，滅菌，制得發(fā)酵培養(yǎng)基B；

步驟2）發(fā)酵工藝

將產(chǎn)谷氨酸的黃色短桿菌（brevibacterium flavum）按8-10％接種量將種子液接入裝有60L發(fā)酵培養(yǎng)基A的100L發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)，所述種子液的OD600nm為13.5，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10L發(fā)酵培養(yǎng)基B，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中，控制發(fā)酵溫度30-36℃，通風比1∶0.7-0.9，攪拌轉速200-400r/min，溶氧維持在20-30％，流加葡萄糖溶液維持殘?zhí)遣坏陀?.0％，流加消泡劑消泡；

步驟3）提取分離工藝

取發(fā)酵液，采用高速碟片離心機離心，收集濾液和菌體蛋白沉淀；往濾液中添加0.5-2%的絮凝劑，靜置6-12h，板框過濾，收集液體；然后經(jīng)過陶瓷膜進行過濾，收集濾液；將濾液引入脫色罐，活性炭的添加量為0.5-1%，脫色時間為30-120min，過濾收集脫色液；將脫色液經(jīng)過脫色膜進行二次脫色，收集脫色清液；將脫色清液通過順序式模擬移動床進行色譜分離得到提取液；將提取液經(jīng)四效濃縮、離心、流化床噴霧干燥，即得。

2.根據(jù)權利要求1所述的制造方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基A的制備方法為：

取各原料：葡萄糖80g/L，酵母浸膏20g/L，K₂HPO₄ 2g/L，MgSO₄·7H₂O 50mg/L，2-羥基乙胺40mg/L，CeCl₃10mg/L，MnSO₄·H₂O 3mg/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 3mg/L，VB₁10mg/L，生物素7μg/L；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)pH為6.5，121℃滅菌15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基A。

3.根據(jù)權利要求1所述的制造方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基B的制備方法為：

取各原料：琥珀酸5g/L，尿素2g/L，殼聚糖80mg/L；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)pH為6.5，121℃滅菌15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基B。

4.根據(jù)權利要求1所述的制造方法，其特征在于，所述絮凝劑由殼聚糖和海藻酸鈉按照2:1的質(zhì)量比混合制得。