[發明專利]一種微流控芯片免疫檢測試劑盒及其檢測方法在審
| 申請號: | 201911310232.6 | 申請日: | 2019-12-18 |
| 公開(公告)號: | CN111077319A | 公開(公告)日: | 2020-04-28 |
| 發明(設計)人: | 楊金易;吳穎;曾道平;蘇曉娜;沈玉棟;王弘;陳麗;韋田 | 申請(專利權)人: | 華南農業大學 |
| 主分類號: | G01N33/58 | 分類號: | G01N33/58;G01N33/53;B01L3/00 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人: | 孫鳳俠 |
| 地址: | 510642 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 微流控 芯片 免疫 檢測 試劑盒 及其 方法 | ||
1.一種微流控芯片免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒含有微流控芯片,包括圓片蓋板(1)和圓片底板(2);所述圓片底板(2)內設有一條或多條檢測單元,所述檢測單元設置在圓片底板(2)的半徑軸上,以圓片底板(2)的圓心點發散排列;所述檢測單元自圓點向邊緣依次排列有儲液池(21)、混合反應池(22)、檢測池(23)、廢液池(24)和第一通氣孔(25),其依次通過微通道進行連接;其中所述混合反應池(22)固定有檢測藥物相應熒光探針;所述檢測池(23)內固定有羊抗鼠免疫球蛋白G及相應藥物抗原;
所述圓片蓋板(1)上還設有進樣孔(11)和第二通氣孔(12);所述進樣孔(11)的位置與圓片底板(2)上儲液池(21)的位置相對應;所述第一通氣孔(25)和第二通氣孔(12)位置相對應;
所述圓片蓋板(1)和圓片底板(2)通過上下鍵合而成。
2.根據權利要求1所述微流控芯片免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述圓片蓋板(1)和圓片底板(2)的圓點出均設有固定孔(3)。
3.根據權利要求1所述微流控芯片免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述圓片底板(2)為聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚酰胺、聚苯乙烯、聚碳酸酯、環氧樹脂和/或聚氨酯材料制備。
4.根據權利要求1所述微流控芯片免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述微通道的寬度為5~50μm,深度為5~150μm。
5.根據權利要求1所述微流控芯片免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述儲液池(21)、混合反應池(22)、檢測池(23)和廢液池(24)的容積各自為10~40μL。
6.根據權利要求1所述微流控芯片免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述微流控芯片僅有進樣孔(11)和第二通氣孔(12)與外界相通。
7.根據權利要求1所述微流控芯片免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述藥物相應熒光探針通過點樣涂抹在混合反應池(22)中,并于4℃固定0.5h;所述羊抗鼠免疫球蛋白G及相應藥物抗原通過點樣在檢測池(23),并于4℃固定1h。
8.權利要求1至7所述微流控芯片免疫檢測試劑盒在可食性動物組織、動物尿液和/或動物血清中藥物殘留檢測中的應用。
9.根據權利要求8所述應用,其特征在于,所述藥物為β-受體激動劑、氯霉素、氟苯尼考、孔雀石綠、金剛烷胺、喹乙醇、大環內酯類、呋喃類、磺胺類、氟喹諾酮類、四環素類、氨基糖苷類和/或青霉素類藥物或其代謝物。
10.權利要求1至7所述微流控芯片免疫檢測試劑盒的檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:
S1.根據待檢測藥物的種類,制備具有相應的熒光探針和藥物抗原的微流控芯片;
S2.將制備好的微流控芯片通過固定孔固定在離心機中;然將將待檢測樣品通過進樣孔(11)加入到微流控芯片的儲液池(21);然后進行離心,驅動儲液池(21)中的液體進入混合反應池(22)中,并與其中固定的熒光探針混合反應3min;二次離心驅動混合液進入檢測池(23),與其中羊抗鼠免疫球蛋白G及藥物抗原反應5min;再次離心驅動,使得多余的液體進入廢液池(24)中;
S3.然后進行檢測,檢測(23)中的熒光強度,并將檢測信號值進行換算,即可得到待測物的檢測濃度。
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