[發(fā)明專利]柴胡地上部分發(fā)酵產(chǎn)物及其制備方法、監(jiān)測方法和應(yīng)用

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• 申請日: 2019-12-18
• 公開（公告）號: CN111084273A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 詹華強;董婷霞;郭舒臣;夏翊騰;郭瑞;王懷友
• 申請（專利權(quán)）人: 香港科技大學深圳研究院
• 主分類號: A23K10/12
• 分類號: A23K10/12;A23K10/37;A23K50/80;A01K61/13;A61K36/233;A61P31/04;G01N30/02
• 代理公司: 深圳市順天達專利商標代理有限公司 44217
• 代理人: 郭偉剛

本發(fā)明采用植物乳桿菌對柴胡地上部分進行不同時間的發(fā)酵，在柴胡地上部分的發(fā)酵過程中，3種黃酮(蘆丁，槲皮素?3?O?β?L?阿拉伯糖苷，異槲皮苷)和DL?3?苯基?2?羥丙酸的含量隨著發(fā)酵時間延長而增加，具有時間依賴性；經(jīng)過發(fā)酵的柴胡地上部分，隨著發(fā)酵時間的增加，抑菌活性會增強，對水生病原菌的抑菌效果明顯強于非水生病原菌，且具有高度敏感性；因此，可用于代替飼料中的抗生素，應(yīng)用到水產(chǎn)養(yǎng)殖中。此外，采用本發(fā)明中所建立合適的生物樣品處理方法和UPLC?MS?MS方法對發(fā)酵液中成分的含量可進行動態(tài)測定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種植物乳桿菌發(fā)酵柴胡地上部分的制備新用途，及其在水生病原菌中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，水產(chǎn)動物感染各種疾病的危險性大大增加。為了預防和治療水產(chǎn)動物疾病、促進動物生長發(fā)育和提高飼料利用率，飼料生產(chǎn)廠家把抗生素類藥物作為飼料添加劑加入到飼料中作為促生長劑和藥物使用。但隨著長期、大量的使用抗生素類添加劑，部分抗生素會在水產(chǎn)動物體內(nèi)積累，引起藥物殘留，從而間接傳遞和影響到消費者，嚴重影響人類健康和環(huán)境安全。水產(chǎn)品質(zhì)量安全已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖健康可持續(xù)發(fā)展中備受關(guān)注的熱點問題。

水產(chǎn)養(yǎng)殖中的抗生素的濫用主要產(chǎn)生兩方面的負面效應(yīng)：一是形成耐藥性，無法治愈病害，造成動物大量死亡和藥物投入的雙重損失。使用抗生素會使養(yǎng)殖環(huán)境中的菌群形成耐藥性，一旦致病力強的病菌對人畜共用的抗生素獲得了耐藥性，人類感染此類病菌后，本來有效的抗生素療效會減小甚至無效，導致人類對某些疾病失去體抗力。二是獸藥殘留；那些只能夠用于養(yǎng)殖動物的抗生素，會通過食物鏈進入人體，會對人體產(chǎn)生危害，影響人類健康。同時，抗生素會破壞養(yǎng)殖環(huán)境中的微平衡，污染環(huán)境；還會抑制養(yǎng)殖動物的免疫機能。

因此，開發(fā)一種低毒、安全、有效、且不易產(chǎn)生耐藥性的抗水生病害飼料添加劑，來替代現(xiàn)有抗生素，是目前急需解決的問題。

由于目前水生動物養(yǎng)殖中多以抗生素作為飼料添加劑，而抗生素會通過食物鏈的傳遞，危及到人們的健康。研究發(fā)現(xiàn)，噴霧干燥血漿蛋白粉、中草藥、益生菌、益生元以及卵黃抗體等均可替代抗生素作為飼料添加劑使用，其中中草藥是傳承四千多年中國醫(yī)學寶庫的瑰寶，兼具營養(yǎng)和疾病治療雙重作用，具有毒性低、資源廣泛、不易產(chǎn)生耐藥性的優(yōu)點。受到養(yǎng)殖戶的歡迎，也引起研究人員的關(guān)注。

柴胡來源于傘形科植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)或狹葉柴胡的干燥根(Bupleurum scorzonerifolium Willd.)，廣泛分布于東北、華北、西北、華東、湖北和四川等地，為常用中藥，在我國已有2000多年的應(yīng)用歷史，首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，原名胡、地薰，列為上品，至宋代《圖經(jīng)本草》始易其名為柴胡，被2015版《中華人民共和國藥典》收載，按性狀分為“南柴胡”和“北柴胡”。柴胡味辛、苦，性微寒，具有疏散退熱、疏肝解郁、升舉陽氣等功效，主治感冒發(fā)熱、寒熱往來、瘧疾、月經(jīng)不調(diào)及子宮脫垂等癥。現(xiàn)代藥理研究表明柴胡具有解熱、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗炎、保肝利膽、抗菌、抗病毒及抗腫瘤等作用。柴胡一般只將根部作為藥用部位，而將地上部分丟棄，造成柴胡地上部分資源的極大浪費。研究報道表明，柴胡的地上部位莖、葉、花、果實和地下部分根都含有豐富的黃酮類成分，且不同部位的含量不同，據(jù)文獻報道地上部位總黃酮含量遠高于地下部位。文獻研究表明柴胡水提物對金黃色葡萄球菌和傷寒桿菌有明顯的抑制作用，并且可降低由傷寒桿菌引起的小鼠急性腹腔感染的死亡率；除此之外，柴胡地上部分乙醇提取物對表皮葡萄球菌、福氏志賀菌、大腸埃希菌和化膿鏈球菌都表現(xiàn)出極為顯著的抑菌效果。

隨著微生物發(fā)酵技術(shù)的廣泛應(yīng)用，新興的微生物與傳統(tǒng)中藥共發(fā)酵已逐步成為一種提高傳統(tǒng)中藥活性成分的方法。微生物在與中藥發(fā)酵過程中會產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物，例如苯基乳酸，其與中藥活性成分相互作用，起到協(xié)同增效減毒的作用。同時微生物產(chǎn)生的各類活性酶有助于中藥活性成分的釋放。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是涉及一種植物乳桿菌發(fā)酵柴胡地上部分的制備新用途，及其在水生病原菌中的應(yīng)用。