[發(fā)明專利]gp96-豬瘟E2融合蛋白及其制備方法和疫苗有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911304442.4 | 申請日： | 2019-12-17 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN110950968B | 公開（公告）日： | 2021-08-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 賀筍;張國慶;席娜;李健友;王海麗;車廣勝;潘毅平 | 申請（專利權(quán)）人： | 天康制藥（蘇州）有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C07K19/00 | 分類號(hào)： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/866;A61K39/187;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 李雙艷 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)蘇州片*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | gp96 豬瘟 e2 融合 蛋白 及其 制備 方法 疫苗 | ||
本發(fā)明提供了一種gp96?豬瘟E2融合蛋白及其制備方法和疫苗，涉及生物技術(shù)領(lǐng)域。該gp96?豬瘟E2融合蛋白含有g(shù)p96片段和豬瘟E2片段。使用該gp96?豬瘟E2融合蛋白免疫機(jī)體能夠顯著提高機(jī)體的細(xì)胞免疫水平和體液免疫水平。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種gp96-豬瘟E2融合蛋白及其制備方法和疫苗。
背景技術(shù)
豬瘟是由豬瘟病毒引起的一種高度接觸性，致死性傳染病，嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。在我國，對該病主要的防控策略仍然以疫苗免疫為主，目前，市場上豬瘟疫苗主要依靠引起抗體水平來達(dá)到對機(jī)體的保護(hù)，但對有包膜的RNA病毒來說，機(jī)體的主要防御方式以細(xì)胞免疫為主，因此，細(xì)胞免疫對豬瘟防控非常重要。
傳統(tǒng)豬瘟疫苗為C株弱毒疫苗，安全性雖然較高，但是臨床應(yīng)用，無法區(qū)分野毒感染和疫苗免疫毒，對于有凈化要求的養(yǎng)殖場來說，新型豬瘟E2亞單位疫苗是個(gè)不錯(cuò)的選擇，既能產(chǎn)生較好的免疫保護(hù)，而且還能提供鑒別診斷，有利于養(yǎng)殖場進(jìn)一步做豬瘟精華。但是目前E2亞單位疫苗不能有力的提高機(jī)體的細(xì)胞免疫水平。因此，一種能夠有效的提高機(jī)體細(xì)胞免疫水平的豬瘟E2亞單位疫苗是目前需要的。
有鑒于此，特提出本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一目的在于提供一種gp96-豬瘟E2融合蛋白，該gp96-豬瘟E2融合蛋白免疫后能夠顯著提高機(jī)體的細(xì)胞免疫水平。
本發(fā)明的第二目的在于提供編碼上述gp96-豬瘟E2融合蛋白的基因。
本發(fā)明的第三目的在于提供和gp96-豬瘟E2融合蛋白相關(guān)的生物材料。
本發(fā)明的第四目的在于提供上述gp96-豬瘟E2融合蛋白的制備方法。
本發(fā)明的第五目的在于提供一種疫苗，該疫苗包含上述gp96-豬瘟E2融合蛋白、上述基因和上述生物材料中的至少一種。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明特采用如下技術(shù)方案：
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種gp96-豬瘟E2融合蛋白，所述gp96-豬瘟E2融合蛋白含有g(shù)p96片段和豬瘟E2片段。
優(yōu)選地，所述gp96片段包括gp96的ATP結(jié)合區(qū)；
優(yōu)選地，所述gp96片段的核苷酸序列為如SEQ ID NO.1所示序列，或?yàn)橐許EQ IDNO.1所示序列為基礎(chǔ)經(jīng)密碼子優(yōu)化的序列。
優(yōu)選地，所述豬瘟E2片段的核苷酸序列為如SEQ ID NO.2所示序列，或?yàn)橐許EQ IDNO.2所示序列為基礎(chǔ)經(jīng)密碼子優(yōu)化的序列。
優(yōu)選地，gp96-豬瘟E2融合蛋白由氨基端至羧基端依次含有g(shù)p96片段和豬瘟E2片段；
優(yōu)選地，所述gp96-豬瘟E2融合蛋白的羧基端含有KDEL序列；
優(yōu)選地，所述KDEL序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
優(yōu)選地，所述gp96-豬瘟E2融合蛋白含有信號(hào)肽；
優(yōu)選地，所述gp96-豬瘟E2融合蛋白含有蜂素信號(hào)肽；
優(yōu)選地，所述蜂素信號(hào)肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
優(yōu)選地，所述gp96-豬瘟E2融合蛋白中還含有標(biāo)簽；
優(yōu)選地，所述標(biāo)簽包括His標(biāo)簽、Flag標(biāo)簽、NusA標(biāo)簽、SUMO標(biāo)簽、GST標(biāo)簽和MBP標(biāo)簽中的一種或多種。
優(yōu)選地，所述gp96-豬瘟E2融合蛋白由昆蟲細(xì)胞桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)表達(dá)；
優(yōu)選地，昆蟲細(xì)胞包括High FiveTM細(xì)胞。
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