[發明專利]一種辣椒白絹病抗病性鑒定方法

在審

• 申請號: 201911294481.0
• 申請日: 2019-12-16
• 公開（公告）號: CN111139282A
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 鄭井元;周書棟;朱春暉;馬艷青;李雪峰
• 申請（專利權）人: 湖南省蔬菜研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12R1/645
• 代理公司: 長沙和雅知識產權代理事務所(普通合伙) 43238
• 代理人: 林傳貴

本發明屬于作物抗病性鑒定技術領域，具體涉及一種辣椒白絹病抗病性鑒定方法。本發明包括以下步驟：(1)活化并培養辣椒白絹病菌，制備病原菌接種菌條；(2)在滅菌基質中播種，培育接種用辣椒苗，采用菌條包埋法進行接種，辣椒苗的接種部位為距辣椒莖基部1cm處；(3)接種后進行日常管理，6d后記錄各植株的病級數并計算病情指數，評價辣椒品種對辣椒白絹病的抗病性。本發明首次提出了一種辣椒白絹病抗性鑒定方法，本發明的接種方法操作簡便，鑒定結果準確可靠，病情判別靈敏度高，不易受環境和氣候因素影響，接種后發病均勻、結果穩定性好，可操作性強，有利于提高抗病材料的篩選效率。

技術領域

本發明屬于作物抗病性鑒定技術領域，具體涉及一種辣椒白絹病抗病性鑒定方法。

背景技術

辣椒白絹病是辣椒生產過程中發生的土傳性病害，病原菌為齊整小核菌(Sclerotium rolfsii sacc.)，其癥狀為：莖基部著生白色絹絲狀菌絲，呈輻射狀擴散，濕度大的時候，地上和莖基部更加明顯，發生后期，莖基部產生大量褐色油菜籽樣小菌核。近年來，由于氣候變化異常、連作、主栽品種退化等因素的共同影響，辣椒白絹病已經成為長江中下游地區辣椒生產過程中的主要流行性病害，給辣椒生產和產業造成了重大經濟損失。防治白絹病主要采用化學農藥等方法，但該方法防治效果不理想，并且一旦發現病狀再防治，則收效甚微。而種植抗病品種是防治辣椒白絹病最有效的綠色、環保手段。抗病品種的培育需要利用有效的抗病性鑒定方法進行抗性材料的篩選、評價和鑒定。

目前，辣椒白絹病及其抗病性鑒定尚未有系統性的研究和報道，缺乏相應對的行業標準和地方標準，導致白絹病的抗病性鑒定異常困難，抗病品種的培育進度滯后于病害發生發展速度。而生產中對辣椒白絹病的抗性鑒定以田間鑒定為主，主要方法為將不同辣椒品種種植在一定范圍的田間里，在生產過程中采用目測法調查發病率，這種方法受環境條件和氣候條件的限制，不準確、不精準，隨意性強，不適合作為辣椒白絹病抗性的技術標準。因此，建立辣椒白絹病的抗病性鑒定方法顯得尤為必要和迫切。

發明內容

針對以上技術問題，本發明的目的是提供一種辣椒白絹病抗病性鑒定方法，能夠快速、準確地對育種材料進行辣椒白絹病抗病性鑒定，有利于抗病品種的培育篩選。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種辣椒白絹病抗病性鑒定方法，包括以下步驟：

(1)活化并培養辣椒白絹病菌，制備病原菌接種菌條；

(2)在滅菌基質中播種，培育接種用辣椒苗，采用菌條包埋法進行接種，辣椒苗的接種部位為距辣椒莖基部1cm處；

(3)接種后進行日常管理，6d后記錄各植株的病級數并計算病情指數，評價辣椒品種對辣椒白絹病的抗病性；

其中，所述步驟(1)的具體過程為：從采集的病苗上用消毒鑷子挑取菌絲或菌核接種于PDA培養基中，于28℃暗培養4-5d，選擇無雜菌污染、生長狀況良好的菌落，挑取白絹病菌菌絲或菌核接入新的PDA培養基中，然后置入28℃的培養箱中暗培養4-5天，重復3-4次直至無雜菌污染；使用前挑取菌核或菌絲塊移至裝有PDA培養基的無菌培養皿中央，于28℃進行活化5d，將培養5d的PDA培養基用0.3mm×0.5mm的打孔器打孔，制作成接種用的白絹病菌菌條待用。

進一步地，所述步驟(2)中育苗基質于121℃蒸汽滅菌30min。

進一步地，所述步驟(2)中待鑒定辣椒種子用84消毒液浸種6-10min，滅菌水沖洗后28℃溫箱催芽，后播種于育苗缽內。

進一步地，所述步驟(2)中育苗溫度為22-28℃。

進一步地，所述步驟(2)中菌條包埋法具體為：將菌條置于距辣椒莖基部1cm處，覆蓋0.2-0.5mm育苗基質，接種后澆水至育苗基質濕度飽和。