[發明專利]小槐花中檸檬酚的提取方法及其用途

在審

• 申請號: 201911292572.0
• 申請日: 2019-12-16
• 公開（公告）號: CN110964028A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 黃周鋒;胡筱希;陸國壽;黃建猷;譚曉
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區中醫藥研究院
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;A61K31/352;A61P35/00;A61P35/04;A61P1/16
• 代理公司: 北京天盾知識產權代理有限公司 11421
• 代理人: 胡凱;劉亞斌

本發明公開了一種小槐花中檸檬酚的提取方法，包括以下步驟：(1)原料預處理；(2)回流濃縮；(3)制樣：將液狀浸膏加入柱層析硅膠和乙醇拌樣，蒸干，直至得到分散狀樣品；(4)柱層析分離：將柱層析硅膠放入層析柱內，加入乙酸乙酯至可流動狀固液混合物，將分散狀樣品加入到層析柱內，用乙酸乙酯洗脫層析柱，等量收集各個流份，然后確認檸檬酚是否出來完全，富集含有檸檬酚的部分流份，蒸發，得到檸檬酚。本發明小槐花中檸檬酚的提取方法，其提取方法簡單易操作，步驟少。利于工業化生產。使用的溶劑種類少，全部可以回收重復利用。提高了小槐花中檸檬酚的得率。檸檬酚在制備治療抗肝癌藥物中的用途，抑制人肝癌HepG2細胞的增殖和遷移。

技術領域

本發明涉及中藥制劑領域，特別涉及一種小槐花中檸檬酚的提取方法及其用途。

背景技術

小槐花Desmodium caudatum(Thunb.)DC.為豆科山螞蝗屬植物，為廣西壯、瑤民族常用藥材，壯藥名為棵文沾、瑤藥名為握麻紅，其分布于廣西、安徽、浙江、江西等省。中醫認為其味甘、苦、涼，具有清熱解毒，祛風透疹，消積止痛功效，用于感冒發熱，疹出不透，小兒疳積，脘腹疼痛，泄瀉。壯醫認為其味甜、苦，平，調龍路，通氣道谷道，清熱毒，止血，用于心頭痛(胃痛)，白凍(泄瀉)，月經不調，喯疳(疳積)，貧痧(感冒)，北嘻(乳癰)，狠尹(癤腫)。瑤藥認為其味苦，性涼，清熱解毒，消積，散瘀利水，健脾開胃，用于治咳嗽、吐血、水腫、胃脘痛、小兒疳積、跌打損傷、癰瘡潰瘍、燒燙傷潰爛。

肝癌是常見的惡性腫瘤之一，發病及病死率很高，近年來的研究發現從中藥中提取分離的天然有效成分在腫瘤疾病的治療中起到了積極作用。檸檬酚是從廣西壯、瑤藥材小槐花中分離得到的一種A環并吡喃環黃酮結構黃酮。研究發現A環并吡喃環黃酮具有良好的抗腫瘤活性，例如桑辛素(Morusin) 具有良好的抗腫瘤活性。Tseng T H等對合成的桑辛素(Morusin)進行了活性研究，發現桑辛素(Morusin)在三種腫瘤細胞下具有強烈的抗腫瘤活性。

一些研究已經發現肌動蛋白細胞骨架的重組是細胞黏附能力和細胞形態改變得以實現的關鍵，藥物干預后引起細胞骨架蛋白解聚，分析其作用機制可能是藥物引起了細胞骨架蛋白的解聚從而導致了凋亡的發生。Rao等研究表明細胞骨架聚合/解聚狀態的改變，對惡性腫瘤細胞的形態和表型有非常重要的調節作用，認為干預細胞骨架微絲重組可作為抗癌藥物的作用靶點，也可作為研發新的抗腫瘤藥物的依據。

目前檸檬酚的提取方法工序復雜、費工、費時，且提取檸檬酚的得率少。

公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

發明內容

本發明的目的在于提供一種小槐花中檸檬酚的提取方法，從而克服檸檬酚提取工序復雜、不能工業化生產的缺點。

本發明的另一個目的在于提供檸檬酚在制備抗肝癌藥物上的應用。

為實現上述目的，本發明提供了一種小槐花中檸檬酚的提取方法，包括以下步驟：

(1)原料預處理：取小槐花莖或/和葉部位晾干、粉碎得到樣品；

(2)回流濃縮：將樣品放入回流裝置中，加入乙醇回流，得到回流提取液，再將回流提取液蒸發，濃縮，得到液狀浸膏；

(3)制樣：將液狀浸膏加入柱層析硅膠和乙醇拌樣，蒸干，直至得到分散狀樣品；

(4)柱層析分離：將柱層析硅膠放入層析柱內，加入乙酸乙酯至可流動狀固液混合物，打開層析柱活塞，用乙酸乙酯沖洗至柱層析硅膠緊密，將分散狀樣品加入到層析柱內，用乙酸乙酯洗脫層析柱，等量收集各個流份，然后確認檸檬酚是否出來完全，富集含有檸檬酚的部分流份，蒸發，得到檸檬酚。