[發明專利]一種基于雙香豆素衍生物的過氧化亞硝酸鹽熒光探針、制備方法與應用

有效

• 申請號: 201911289368.3
• 申請日: 2019-12-13
• 公開（公告）號: CN110964044B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 盛文龍;劉可春;靳夢;王雪;陳錫強;王利振
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生物研究所
• 主分類號: C07F5/02
• 分類號: C07F5/02;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 濟南佰智蔚然知識產權代理事務所(普通合伙) 37285
• 代理人: 趙允洲

本發明涉及一種基于雙香豆素衍生物的過氧化亞硝酸鹽熒光探針、制備方法與應用。具體地，本發明的探針是一類基于雙香豆素衍生物的熒光探針，可作為過氧化亞硝酸鹽熒光探針，用于測量、檢測或篩選過氧化亞硝酸鹽及活細胞熒光成像。這類探針可實現如下技術效果中的至少一個：高選擇性識別過氧化亞硝酸鹽、可以快速對過氧化亞硝酸鹽實現響應、可以實現對過氧化亞硝酸鹽的超靈敏分析、可生理水平條件下檢測過氧化亞硝酸鹽、具有較強的抗干擾能力、合成簡單以及性質穩定。

技術領域

本發明屬于熒光探針領域，具體涉及一種基于雙香豆素衍生物的過氧化亞硝酸鹽熒光探針及其在測量、檢測或篩選過氧化亞硝酸鹽及活細胞熒光成像方法中的應用；本發明還提供了制備所述熒光探針的方法。

背景技術

過氧化亞硝酸鹽是一種典型的活性氧/氮物種，它是由一氧化氮和超氧自由基快速反應而生成，在生理條件下其半衰期很短。由于過氧亞硝酸鹽具有強大的氧化能力和硝化能力，它在許多生理過程和病理過程中起著關鍵作用。例如，過氧化亞硝酸鹽在細胞信號轉導通路中起著重要的作用，但是，由于其強大的氧化、硝化能力，過氧化亞硝酸鹽也會對細胞中許多生物大分子造成損害，例如DNA和蛋白質。此外，當過氧化亞硝酸鹽的濃度異常時，會導致許多疾病，如心血管疾病和損傷、阿爾茨海默氏病、自身免疫，甚至癌癥。相關研究進一步表明，過氧化亞硝酸鹽的過量生產與癌變之間存在重要的聯系，這些發現都可以表明過氧化亞硝酸鹽可能具有雙重的生理和病理作用。

鑒于此，發展能夠有效在生理水平條件下檢測過氧化亞硝酸鹽的分析方法是極其重要和有意義的。在這些眾多的檢測方法中熒光探針由于其特有的優點而成為研究人員關注的焦點。然而，目前報道的熒光探針仍存在一些問題，包括選擇性不夠好、響應速度不夠快、合成復雜、靈敏度不高等，并且由于生命體內的其他物質會對過氧化亞硝酸鹽的檢測構成潛在干擾。因此，發展快速，高選擇性、高靈敏度、合成簡單的過氧化亞硝酸鹽熒光探針成為本領域技術人員亟待解決的課題。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的是在于提供一類制備簡單的快速超靈敏高選擇性過氧化亞硝酸鹽的熒光探針，以及它們的制備方法和用途，具有合成簡單、選擇性好、靈敏度高的特點，并且能夠在生理水平條件下對過氧化亞硝酸鹽進行有效測量、檢測或篩選。

具體而言，本發明提供了一種化合物，具有式(I)所示的結構：

式(I)中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆和R₇為獨立地選自由氫原子、直鏈或支鏈烷基、直鏈或支鏈烷氧基、磺酸基、酯基和羧基組成的組；且其中的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆和R₇可以相同或不同。

在本發明的一些具體實施方案中，本發明的化合物是R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆和R₇均為氫原子的式(I)化合物，其結構式如下：

本發明還提供了式(I)化合物的制備方法，包括如下步驟：使式(III)化合物與4-(溴甲基)苯硼酸頻哪醇酯反應制備得式(I)化合物，其反應式如下：