[發明專利]一種用于研究腦-腸神經環路的方法及其應用有效
| 申請號： | 201911284121.2 | 申請日： | 2019-12-13 |
| 公開（公告）號： | CN111088288B | 公開（公告）日： | 2023-10-03 |
| 發明（設計）人： | 湛琴琴;李志玲;詹陽 | 申請（專利權）人： | 中國科學院深圳先進技術研究院 |
| 主分類號： | C12N15/869 | 分類號： | C12N15/869;G01N21/64;A61D1/00;A61D7/00 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 鞏克棟 |
| 地址： | 518055 廣東省深圳*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 研究 神經 環路 方法 及其 應用 | ||
1.一種用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述方法包括：向哺乳類動物的腸壁注射攜帶目的基因的跨突觸病毒，使其在中樞神經系統和外周神經系統同時表達目的基因，并以此研究腦-腸神經環路。
2.如權利要求1所述的用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述目的基因包括標記神經元的基因；
優選地，所述標記神經元的基因包括增強型綠色熒光蛋白基因。
3.如權利要求1或2所述的用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述跨突觸病毒包括偽狂犬病病毒；
優選地，所述偽狂犬病病毒為PRV152；
優選地，所述哺乳類動物包括小鼠、大鼠、豚鼠、豬、狗或兔。
4.如權利要求1-3中任一項所述的用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述向哺乳類動物的腸壁注射攜帶目的基因的跨突觸病毒的方法包括如下步驟：將哺乳類動物麻醉后進行開腹，暴露腸道組織；將病毒溶液注射入腸壁組織；將腸道歸位并縫合。
5.如權利要求4所述的用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述哺乳類動物為小鼠，所述開腹是指以小鼠腹部偏左側距離生殖器縱向線0.8-1.2cm的地方為起點，從骨盆至胸骨做3-4cm的垂直切口。
6.如權利要求4或5所述的用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述哺乳類動物為小鼠，所述注射的部位為小鼠結腸后段中部位置；
優選地，所述病毒溶液的注射量為6-10μL；
優選地，所述病毒溶液的濃度為105-107pfu/mL；
優選地，所述注射的速率為0.5-1.5μL/min。
7.如權利要求4-6中任一項所述的用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述縫合包括肌肉層縫合和表皮層縫合；
優選地，所述肌肉層縫合采用間斷縫合方式；
優選地，所述表皮層縫合采用連續縫合方式。
8.如權利要求1-7中任一項所述的用于研究腦-腸神經環路的方法，其特征在于，所述表達的時間為距離向哺乳類動物的腸壁注射攜帶目的基因的跨突觸病毒110-120h后。
9.如權利要求1-8中任一項所述的用于研究腦-腸神經環路的方法在研究腦-腸神經環路中的應用。
10.如權利要求1-8中任一項所述的用于研究腦-腸神經環路的方法在研究社交行為中的應用。
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