[發明專利]一種卵囊藻培養工藝

在審

• 申請號: 201911279506.X
• 申請日: 2019-12-12
• 公開（公告）號: CN110760446A
• 公開（公告）日: 2020-02-07
• 發明（設計）人: 王兆偉
• 申請（專利權）人: 寧波浮田生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12N13/00;C12R1/89
• 代理公司: 32260 無錫市匯誠永信專利代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 汪建華

本發明提供了一種卵囊藻培養工藝，誘變產生具備耐高濃度醋酸鈉特性的卵囊藻藻株，并針對性改進培養工藝，采用發酵罐培養工藝，改變培養基組分，最后進行光適應性培養，大幅縮短卵囊藻種液的培養周期，適用于擴種，且培養的藻株藻相穩定，不易老化及倒藻，并且卵藻種液適于長時間存儲及運輸。

技術領域

本發明涉及水產養殖水質調控和水體環境治理技術領域，具體涉及一種卵囊藻培養工藝。

背景技術

卵囊藻主要分布于河口和水產養殖池塘等富含有機物的水體中，具有持續時間長和種群穩定等特點，能降低水體中的氨氮、亞硝酸鹽等有害因子的濃度，提高水中的溶氧，從而使水環境處于良性的平衡狀態，抑制弧菌的生長。因其特性，卵囊藻廣泛存在于南方對蝦養殖池，可調控和改善養殖環境并防止對蝦疾病。

但傳統的卵囊藻培養方式是采用開放水泥池培養，其培養規模大，但缺點是：(1)易污染，占地面積大，受天氣影響大，不易掌控，而且藻細胞生長緩慢、倍增時間長、一次性投資大而產量低，不適用于擴種階段；(2)傳統方式所培育的卵囊藻藻相不夠穩定，易老化和倒藻，其用于對蝦等養殖池塘特別是養殖中后期時易發生倒藻現象，死亡的藻類會產生大量藻毒素，會出現池塘水質不穩定的現象，進而導致對蝦等海產品的死亡；(3)傳統方式所培育的卵囊藻難以在常溫下進行長時間的存儲和運輸，給使用造成不便，這些導致卵囊藻難以在實際生產中得到大規模的應用，需改進。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的是提供一種卵囊藻培養工藝，以至少解決上述一項問題。

技術方案是：

一種卵囊藻培養工藝，包括如下步驟：

a、誘變篩選出在至少10g/L NaAc濃度下培養基中生長的卵囊藻藻株；

b、接種至發酵罐中異養培養，培養基包括如下濃度成分：1.5-3g/L碳源、0.03-0.08g/L磷源、0.2-0.5g/L氮源、0.03-0.08g/L鐵鹽以及微量水溶型維生素，其中碳源為NaAc，罐中pH：7-8，發酵期間添加營養鹽；

C、將發酵完成的藻進行通氣光照培養。

在本公司大量的試驗過程中發現誘變產生的耐高濃度醋酸鈉的卵囊藻，適應性強，藻株藻相穩定，不易老化及倒藻，對此針對性改進培養工藝，采用發酵罐培養工藝，改變培養基組分，最后進行光適應性培養，大幅縮短卵囊藻種液的培養周期，適用于擴種，并且卵藻種液適于長時間存儲及運輸。

在進一步的優化方案中，a步驟中：通過紫外輻射誘變純化的卵囊藻藻株，從而篩選出在10g/L NaAc濃度下培養基中生產的卵囊藻藻株。

更佳地，在10-12g/L NaAc濃度下培養基中接種卵囊藻，通過波長275～320nm的紫外線輻射誘變，時長25min-35min，優選30min。

優選采用UVB于15-20cm的高度輻射誘變，在本公司大量的試驗中，通過上述方法能穩定誘變得到耐高濃度醋酸鈉的卵囊藻藻株。

在進一步的優化方案中，b步驟中接種至發酵罐中的卵囊藻種子液濃度≥300*10⁴/mL，初始接種量5％-10％，有利于發酵培養。

如將上述所得藻株活化后接種入滅菌反應器中通氣光照培養，光照強度500-1000Lx，通氣量為0.2vvm,培養時間4d，使卵囊藻種液達到所需濃度，當然也可采用異養培養的方法，此外通氣量可適應性調整。

在進一步的優化方案中，b步驟中：培養基組分中：碳源-NaAc、氮源-硝酸鉀、磷源-磷酸二氫鉀、鐵鹽-三氯化鐵，維生素包括VB1：0.001-0.003g/L，VB12：0.0001-0.0002g/L，為縮短耐高濃度醋酸鈉的卵囊藻藻株的培養周期，本培養基篩選優化組分，添加本培養基后，藻細胞生長快、倍增時間短。