[發明專利]一種谷胱甘肽的快速檢測方法

在審

• 申請號: 201911275295.2
• 申請日: 2019-12-12
• 公開（公告）號: CN110907446A
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發明（設計）人: 陳金陽;孫夢彤;王妤欣;庫苠月;劉祥茹
• 申請（專利權）人: 湖北師范大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/33;G01N31/10
• 代理公司: 黃石市三益專利商標事務所 42109
• 代理人: 林曉珍

1.一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于，所述檢測方法具體為：將殼聚糖溶液、H₂O₂溶液和3, 3’, 5, 5’-四甲基聯苯胺溶液混合反應，再向混合反應體系中分別加入不同濃度梯度的谷胱甘肽溶液繼續反應，反應完成后通過肉眼觀察和相機拍照加入不同濃度梯度的谷胱甘肽后溶液的顏色，從而根據待測溶液的顏色半定量檢測谷胱甘肽的濃度；或者也可以通過紫外分光光度計測量溶液的吸光度，構建吸光度與谷胱甘肽濃度的線性關系，利用該線性關系即可快速地檢測待測溶液中谷胱甘肽的濃度。

2.根據權利要求1所述的一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于：所述殼聚糖溶液是通過質量分數為1%的乙酸水溶液溶解分子量為50-190kDa的殼聚糖固體配制而成。

3. 根據權利要求1所述的一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于：所述混合反應體系中殼聚糖溶液的終濃度為0.5mg/mL，H₂O₂溶液的終濃度為0.125mM，3, 3’, 5, 5’-四甲基聯苯胺溶液的終濃度為0.625mM。

4.根據權利要求1所述的一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于：所述谷胱甘肽的濃度梯度為0μM、1.25μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM、60μM、80μM、100μM、125μM和200μM。

5.根據權利要求1所述的一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于：所述紫外分光光度計測量溶液在652nm的吸光度。

6. 根據權利要求1所述的一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于：所述吸光度與谷胱甘肽濃度的線性方程為△A = 0.0057 C + 0.012，且線性相關系數R為0.9953。

7.根據權利要求1所述的一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于：所述混合反應體系的反應溫度為37℃，反應時間為30min。

8. 根據權利要求1-7任一項所述的一種谷胱甘肽的快速檢測方法，其特征在于：所述檢測方法具體為，取200μL濃度為1.0mg/mL的殼聚糖溶液、50μL濃度為1.0mM的H₂O₂溶液和50μL濃度為5.0mM的3, 3’, 5, 5’-四甲基聯苯胺溶液混合，在37 oC的條件下反應30min，然后分別加入100μL不同濃度梯度的谷胱甘肽溶液，混勻后繼續反應30min，通過肉眼觀察反應后溶液的顏色或利用相機對溶液進行拍照比對，再利用Image J軟件對拍照圖片進行測定，可獲得不同溶液圖片的紅綠藍顏色平均值，從而實現半定量地分析待測液中谷胱甘肽的濃度；也可以通過使用紫外可見分光光度計分別測量溶液體系在652nm處的吸光度，得到谷胱甘肽終濃度與吸光強度之間的線性關系，利用此線性關系實現定量檢測待測液中谷胱甘肽的濃度。