[發(fā)明專利]一種三通道電化學(xué)發(fā)光傳感器及其在細(xì)胞檢測上的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911270246.X
• 申請日: 2019-12-11
• 公開（公告）號: CN111122551B
• 公開（公告）日: 2022-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱俊杰;劉根;陳子軒;馬誠
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N27/48
• 代理公司: 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 32206
• 代理人: 盧倩

1.一種三通道電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，包括三個并聯(lián)電化學(xué)發(fā)光電解池系統(tǒng)和電化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)；

所述并聯(lián)電化學(xué)發(fā)光電解池系統(tǒng)由三套工作電極和Ag/AgCl電極組成，并聯(lián)接入電化學(xué)發(fā)光分析儀；

所述工作電極是聚苯胺水凝膠修飾的玻碳電極，連接電化學(xué)發(fā)光分析儀的工作端口；

所述Ag/AgCl電極同時連接電化學(xué)發(fā)光分析儀的參比端口和輔助端口；

所述三通道電化學(xué)發(fā)光傳感器的細(xì)胞檢測方法為：

步驟1，電極修飾：

步驟1.1、首先分別用聚苯胺水凝膠修飾玻碳電極A、B、C，制得GCE_A/PAniH、GCE_B/PAniH、GCE_C/PAniH；

步驟1.2、將GCE_B/PAniH上的聚苯胺負(fù)載魯米諾功能化的金納米顆粒(Lu-Au NPs)，再特異性捕獲MCF-7細(xì)胞；

步驟1.3,、將GCE_A/PAniH、GCE_C/PAniH/FA特異性捕獲標(biāo)記有g(shù)-C₃N₄和RuSiO₂ NPs的MCF-7細(xì)胞；

步驟2，電化學(xué)發(fā)光信號的采集：

將步驟1制得的負(fù)載有細(xì)胞的GCE_A/PAniH、GCE_B/PAniH和GCE_C/PAniH電極分別接入所述三通道電化學(xué)發(fā)光傳感器的三個并聯(lián)電化學(xué)發(fā)光電解池系統(tǒng)中，采集g-C₃N₄、Lu-Au NPs和RuSiO₂的ECL信號，分別為ECL_A、ECL_B和ECL_C；

步驟3，細(xì)胞檢測分析

以g-C₃N₄和RuSiO₂的ECL為分析信號的ECL為分析信號，Lu-Au NPs的ECL為參考信號，擬合ECL_A/ECL_B和ECL_C/ECL_B與細(xì)胞濃度的關(guān)系，得出線性回歸方程；

將待檢測的細(xì)胞進(jìn)行步驟1和步驟2的操作，將獲得的ECL_A、ECL_B和ECL_C代入步驟3所得的線性回歸方程，實現(xiàn)細(xì)胞檢測分析的目的。

2.如權(quán)利要求1所述的三通道電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述步驟1.1的具體方法為：

混合溶液A:2ml H₂O、0.921mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50％的植酸水溶液和0.458mL苯胺；溶液B:0.286g過硫酸銨溶于1ml H₂O中；溶液A和B放入冰箱冷卻至4℃；5μL A和B混合溶液迅速滴涂在潔凈的GCE上。

3.如權(quán)利要求1所述的三通道電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述步驟1.2的具體方法為：

將活化后的葉酸滴加到GCE_B/PAniH上制得GCE_B/PAniH/FA，然后滴涂Lu-Au NPs，然后再同B組細(xì)胞懸液一起在37℃下孵育；所述B組細(xì)胞懸液為HA-RuSiO₂、EGF-g-C₃N₄與經(jīng)多聚甲醛處理后的細(xì)胞共同孵育制得，其中HA-RuSiO₂為透明質(zhì)酸修飾的氨基化三聯(lián)吡啶釕摻雜的二氧化硅納米顆粒，EGF-g-C₃N₄為表皮生長因子修飾的g-C₃N₄。