[發明專利]一種對朱紅毛斑蛾幼蟲有高致病力的白僵菌菌株及其應用

有效

• 申請號: 201911265371.1
• 申請日: 2019-12-11
• 公開（公告）號: CN111004724B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 鄭霞林;陳學敏;王小云;陸溫
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/30;A01P7/04;C12R1/645
• 代理公司: 北京市盈科律師事務所 11344
• 代理人: 仲英豪

本發明公開一株對朱紅毛斑蛾PhaudaflammansWalker幼蟲具有高致病力的球孢白僵菌菌株的分離及其應用，該球孢白僵菌Beauveriabassiana菌株命名為PfBb。保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.18839。本發明首次從朱紅毛斑蛾僵蟲中分離得到球孢白僵菌，毒力測試結果表明該菌株對朱紅毛斑蛾幼蟲致病力強，具有開發成為微生物殺蟲劑的潛力，為朱紅毛斑蛾的綠色防控提供技術支撐。

技術領域

本發明屬于害蟲生物防治技術領域，具體涉及一種球孢白僵菌菌株PfBb及其在朱紅毛斑 蛾防治上的應用。

背景技術

朱紅毛斑蛾Phaudaflammans Walker，屬鱗翅目Lepidoptera毛斑蛾科Phaudidae毛斑蛾屬 Phauda。主要危害榕屬Ficus植物，其中以垂葉榕Ficusbenjamina和小葉榕Ficusmicrocarpa 受害最為嚴重。在中國南方及東亞部分國家，榕屬植物分布廣泛，且是城市綠化的必備樹種， 因此該蟲在中國的廣西、廣東、福建、海南和臺灣等地區及印度、越南、泰國、馬拉西亞和 印度尼西亞等國家常暴發危害。近幾年，其在中國南方地區暴發危害的新聞報道屢見不鮮。 朱紅毛斑蛾雌成蟲喜在當年生嫩葉上產卵，幼蟲孵化后自樹冠向下取食，因此受害植株常表 現出“禿頂”現象。朱紅毛斑蛾幼蟲共六齡，低齡幼蟲取食葉片僅留下膜狀表皮；隨著幼蟲 齡期的增長，被啃食的葉片呈孔洞狀甚至葉片被全部取食，僅剩枝條；葉片被食光時，幼蟲 還會取食嫩梢韌皮部，不僅嚴重影響榕樹的生長發育，還影響城市景觀、形象和生態效益。 朱紅毛斑蛾在中國南方地區每年發生2～3代，世代重疊嚴重，每年3～10月均可見其發生和為 害。鑒于該蟲發生和危害期長，具暴發性，化學防治被廣泛推廣應用，但防效甚微，同時化 學防治也威脅居民的生命安全和生態環境，因此急需尋求一種綠色防控技術手段。

白僵菌是一種蟲生真菌，通過菌絲穿透寄主昆蟲的體壁，吸收寄主營養，最終導致寄主 死亡；常被用于害蟲的綠色防控，具有對環境無污染，對人畜及作物安全性高，不易誘導害 蟲產生抗性，持效期長等優勢。目前還未見對朱紅毛斑蛾幼蟲具有高致病力白僵菌株的相關 報道。因此，尋找到對朱紅毛斑蛾幼蟲有高致病力的菌株具有非常重要的應用價值。

發明內容

本發明的目的是提供一種對朱紅毛斑蛾幼蟲具有高致病力的菌株。

為實現上述目的，本發明提供以下技術方案：

一種球孢白僵菌菌株，自廣西壯族自治區河池市都安縣采集的朱紅毛斑蛾幼蟲僵蟲蟲體 上分離純化后得到，編號記為PfBb。將該菌株接種在PDA平板培養基上(馬鈴薯200g，蔗 糖20g，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，自然pH)。其生物學特征為：25℃下培養7天菌落直徑 23.85mm，菌落顏色正面為白色，背面淺黃色，圓形扁平狀，初期為疏絨狀，后期為白色粉狀孢子層。分生孢子為單孢，透明球狀，分生孢子梗叢狀，頂生多個圓柱狀產孢細胞。

對所述白僵菌菌株PfBb進行ITS序列分析，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，堿基數 為549bp。將該菌株的ITS序列與NCBI中已知序列進行BLAST對比，與該菌株最為接近的為球孢白僵菌，ITS序列同源性達100％，結合形態學鑒定，鑒定該菌株為球孢白僵菌。

室內毒力測定采用浸蟲法測定菌株PfBb對朱紅毛斑蛾不同齡期幼蟲的的毒力。表1-2結 果顯示：(1)同一孢子濃度下，蟲齡越低，球孢白僵菌株PfBb的致病力越強，校正死亡率 越高；(2)隨著接種時間的延長，校正死亡率越高；(3)菌株PfBb對朱紅毛斑蛾幼蟲致病力高，在1.0×10⁷孢子/ml濃度下接種8天后，大部分的幼蟲死亡，尤其是對1～4齡幼蟲的校正死亡率達90％以上；1.0×10⁸孢子/ml濃度下處理8天后，1～5齡幼蟲校正死亡率均達100％； (4)球孢白僵菌株PfBb處理后幼蟲的僵蟲率較高，在1.0×10⁷孢子/ml濃度下的1～5齡幼蟲 的僵蟲率達85％以上，表明該菌株產生二次感染的機率較高，持效期長，是一株在朱紅毛斑 蛾的防治上具有潛在意義的生物防治菌株。