[發明專利]一種犬瘟熱、犬細小病毒病、狂犬病三聯亞單位疫苗

有效

• 申請號: 201911242612.0
• 申請日: 2019-12-06
• 公開（公告）號: CN110893234B
• 公開（公告）日: 2023-08-15
• 發明（設計）人: 錢晶;王永山;歐陽偉;夏興霞;王晶宇;馬孫婷;王曉麗;諸玉梅;畢振威
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A61K39/175
• 分類號: A61K39/175;A61K39/23;A61K39/205;A61K39/39;A61P31/20;A61P31/14
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 程斯佳

本發明公開了一種犬瘟熱、犬細小病毒病、狂犬病三聯亞單位疫苗，屬于獸用生物制品領域。本發明的亞單位疫苗是以重組犬瘟熱病毒H蛋白、重組犬細小病毒VP2蛋白以及重組狂犬病病毒G蛋白作為抗原，是通過三種重組桿狀病毒分別感染昆蟲細胞后，經提純處理制備而成。所述的重組桿狀病毒都攜帶有提高蛋白表達的元件，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO：1；重組犬瘟熱病毒H蛋白、重組犬細小病毒VP2蛋白以及重組狂犬病病毒G蛋白都是經昆蟲細胞密碼子優化后的序列，其核苷酸序列分別為SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：3、SEQ?ID?NO：4。本發明制備的亞單位疫苗免疫犬后能夠快速產生特異性抗體，可用于預防犬的犬瘟熱病毒、犬細小病毒以及狂犬病病毒的感染。

技術領域

本發明公開了一種犬瘟熱、犬細小病毒病、狂犬病三聯亞單位疫苗，屬于獸用生物制品領域。

背景技術

犬瘟熱(canine?distemper)是由犬瘟熱病毒(canine?distemper?virus,CDV)引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病，常引起消化道、呼吸道以及神經系統異常等癥狀，并能引起機體免疫抑制(MAGANGA?G?D,等.Molecular?characterization?ofcompletegenome?ofa?canine?distemper?virus?associated?with?fatal?infection?in?dogs?inGabon,Central?Africa[J].Virus?Research,2018,247:21-25.)。該病傳染性強、發病率和死亡率居高不下，已成為危害養犬業和經濟動物養殖業的重要傳染病之一。CDV屬于副黏病毒科麻疹病毒屬的重要成員，是單股負鏈不分節段的RNA病毒，其基因組編碼6個結構蛋白(依次為N、P、M、F、H、L)和2個非結構蛋白(C和V)。其中，H基因全長為1947nt，僅含有一個開放型閱讀框，其編碼的H蛋白是CDV囊膜表面的糖蛋白之一，可與靶細胞表面的受體(如SLAM和nectin-4)相互作用，介導病毒入侵宿主；同時，H蛋白存在著許多中和性抗原表位，是誘導機體產生中和抗體的主要抗原(HIRAMA?K,等.Cytotoxic?T-lymphocyte?activityspecific?for?hemagglutinin(H)protein?of?canine?distemper?virus?in?dogs[J].Journal?ofVeterinary?Medical?Science,2003,65(1):109-112.)。

犬細小病毒病是由犬細小病毒(canine?parvovirus，CPV)引起的一種以劇烈嘔吐、腹瀉、腥臭味糞便為主要表征的烈性傳染病，分為出血性腸炎型和非化膿性兩種(鄭怡婷.犬細小病毒的診斷和防治[J].獸醫導刊,2017(16):171.)。該病以發病率高、傳染性強、病程快、幼犬死亡率高為特點，是犬科動物最主要的傳染性病毒病之一。CPV為細小病毒科細小病毒屬的無囊膜單股負鏈DNA病毒，基因組全長5.2kb，編碼NS1、NS2兩種非結構蛋白及VP1、VP2、VP3三種結構蛋白。病毒的抗原表位通常位于其衣殼蛋白上，CPV病毒衣殼由60個結構蛋白組成，其中包括53～54個VP2蛋白，占衣殼蛋總量的90％，對CPV病毒的抗原性起決定性作用(邱薇,等.犬細小病毒VP2基因的比較及分型研究[J].動物醫學進展,2005,26(5):69-72.)。

狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies?virus，RABV)引起的一種重要的人畜共患傳染病，全球流行，病死率為100％，也是我國重要的公共衛生問題。RABV基因組長約12kb，從3’到5’端依次為編碼N、M1、M2、G、L蛋白的5個基因，各個基因間還含非編碼的間隔序列。其中，G蛋白在囊膜上構成病毒刺突，與病毒致病性有關，是RABV的主要抗原，刺激機體產生體液和細胞免疫，也是唯一誘生中和抗體的保護性免疫抗原(徐蘭,等.狂犬病毒糖蛋白研究進展[J].中國人獸共患病學報,2006,22(9):876-879.)。