[發(fā)明專利]一種基于磁性材料快速檢測青霉素鈉的電化學方法

有效

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• 申請日: 2019-12-05
• 公開（公告）號: CN110887883B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發(fā)明（設計）人: 王虹蘇;王麗;修毅;牛效迪
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/30
• 代理公司: 長春市恒譽專利代理事務所(普通合伙) 22212
• 代理人: 李榮武

1.一種基于磁性材料快速檢測青霉素鈉的電化學方法，其特征在于：工作電極采用合成的磁性介孔空心碳微球和青霉素酶共同修飾磁性玻碳電極表面，具體方法如下所述：

(1)磁性介孔空心碳微球的制備：首先將FeCl₃·6H₂O 0.81g和檸檬酸三鈉0.20g溶解在20mL乙二醇中，然后，加入 1.20g乙酸鈉，劇烈攪拌混合物，形成透明溶液；之后，將溶液轉(zhuǎn)移到50mL高壓釜中，將高壓釜密封并在200℃下加熱并保持8小時，然后將其冷卻至室溫；將產(chǎn)物用乙醇和去離子水洗滌數(shù)次，并在60℃下干燥12小時；通過超聲處理將合成的Fe₃O₄顆粒25mg完全分散在25mL 20mM pH＝8的Tris-HCl緩沖液中30分鐘；將50mg鹽酸多巴胺溶解在25mL去離子水中，在室溫下連續(xù)磁力攪拌下將多巴胺溶液快速注入Fe₃O₄分散體中8小時，之后，收集四氧化三鐵@聚多巴胺核-殼微球，使用磁鐵分選分離，然后用去離子水洗滌數(shù)次，通過將四氧化三鐵@聚多巴胺核-殼微球在氬氣中以5℃/min的速率在700℃下碳化1小時來獲得磁性介孔空心碳微球；

(2)青霉素酶的吸附：準確稱取2mg的磁性介孔空心碳微 球加入4mL pH＝7的PBS緩沖液，超聲分散1小時，隨后加入2mL 2mg/mL的青霉素酶溶液，在30℃和130rpm轉(zhuǎn)速下反應1小時，用磁鐵將材料分離出來，得到吸附青霉素酶的磁性介孔空心碳微球在4℃下保存；

(3)磁性玻碳電極的打磨：首先在麂皮上分別撒上少量1μm，0.3μm和0.05μm的氧化鋁拋光粉，將磁性玻碳電極先在1μm氧化鋁拋光粉上打磨，用去離子水清洗磁性玻碳電極表面；接著將玻碳電極在0.3μm氧化鋁拋光粉上打磨，用去離子水清洗玻碳電極表面；最后將磁性玻碳電極在0.05μm氧化鋁拋光粉上打磨，用去離子水清洗電極表面；然后將電極移入超聲水浴中，依次用蒸餾水，乙醇和蒸餾水清洗2min，室溫下晾干；

(4)工作電極的制備：制備1mg/mL吸附青霉素酶的磁性介孔空心碳微球，取5μL滴加至清洗好的磁性玻碳電極表面，放置4℃晾干，得到工作電極；

(5)青霉素鈉的檢測：將上一步驟中制備的工作電極浸入含有0.5mg/mL氧化蘇木精的不同濃度的青霉素鈉溶液利用三電極檢測系統(tǒng)檢測，檢測方法為差分脈沖伏安法，條件為：起始電位0V，最高電位0.5V。