[發明專利]一種納米雜化絲素蛋白水凝膠及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201911234756.1
• 申請日: 2019-12-05
• 公開（公告）號: CN110917400B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 張黎明;鄧立志;楊凡巧;王彥
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61L27/38
• 分類號: A61L27/38;A61L27/12;A61L27/22;A61L27/52;A61L27/50
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉;蘇運貞

1.一種納米雜化絲素蛋白水凝膠的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將蠶繭和Na₂CO₃水溶液進行煮沸脫膠、洗滌烘干后即得絲素蛋白纖維；將絲素蛋白纖維和LiBr溶液混合，溶解，得到溶液A；將溶液A透析、過濾，得到再生絲素蛋白水溶液；

（2）將納米級羥基磷灰石溶液和步驟（1）中的再生絲素蛋白水溶液混勻后，超聲，得到凝膠化時間可控的nHA雜化絲素蛋白水溶液；

（3）將步驟（2）制備得到的雜化絲素蛋白水溶液與干細胞混勻，原位凝膠化后進行細胞培養，即得納米雜化絲素蛋白水凝膠；

步驟（1）中所述的透析的條件為于4～10℃條件下進行透析；

步驟（2）中所述的超聲的條件為50～200 W超聲5～120 s。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（1）還包括稀釋或濃縮步驟，在過濾步驟后進行。

3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，

步驟（1）中所述的再生絲素蛋白水溶液中再生絲素蛋白的濃度為質量百分比3%～15%；

步驟（2）中所述的納米級羥基磷灰石的用量按相當于所述的再生絲素蛋白質量的2%～30%計算；

步驟（3）中所述的干細胞的密度為3×10³～6×10⁵ 個/mL。

4.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，

步驟（1）中所述的溶液A中的絲素蛋白的質量分數為15%～20%；

步驟（2）中所述的納米級羥基磷灰石溶液中納米級羥基磷灰石的濃度為15～30 mg/mL。

5.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，

步驟（1）中所述的Na₂CO₃水溶液的濃度為0.02 M；

步驟（1）中所述的Na₂CO₃水溶液的用量按Na₂CO₃水溶液：蠶繭=質量比45～55: 1配比計算；

步驟（2）中所述的納米級羥基磷灰石的粒徑小于200 nm。

6.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，

步驟（1）中所述的煮沸時間為15～45 min；

步驟（1）中所述的溶解的條件為45～70℃溶解1～4 h；

步驟（1）中所述的LiBr溶液的濃度為9～9.5 M；

步驟（1）中所述的再生絲素蛋白水溶液在4～10℃條件下保存。

7.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟（3）中所述的凝膠化時間為10～600 s。

8.一種納米雜化絲素蛋白水凝膠，其特征在于，由權利要求1～7任一項所述的制備方法制備得到。

9.權利要求8所述的納米雜化絲素蛋白水凝膠在制備生物醫學工程材料中的應用。