[發(fā)明專利]一種包埋后的番茄紅素的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911231036.X
• 申請日: 2019-12-04
• 公開（公告）號: CN110824065B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王穎;錢一帆;胡浪;陳素玲
• 申請（專利權(quán)）人: 南京中科藥業(yè)有限公司;中科健康產(chǎn)業(yè)集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/54
• 代理公司: 北京思創(chuàng)大成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11614
• 代理人: 尹慧晶

1.一種包埋后的番茄紅素的檢測方法，先將待測樣品進行前處理得到待測液，再通過高效液相色譜法檢測待測液中的番茄紅素，其特征在于，所述的前處理過程中，用4%的氨緩沖溶液對待測樣品進行破包埋；高效液相色譜法所采用的流動相為體積比為90：10的二氯甲烷和甲醇；所述前處理的步驟具體為：先將樣品研磨均勻后，稱取80～120mg置于100 mL棕色容量瓶中，加入10～30mL 4%氨緩沖溶液于水浴中超聲；待溶液冷卻至室溫后用含抗氧化劑的四氫呋喃溶液定容，攪拌后靜置，待溶液澄清后吸取1.0 mL上清液置于10 mL棕色容量瓶中；最后再用體積比為90：10的二氯甲烷和甲醇溶液流動相溶液定容至刻度線，得到待測液；所述4%氨緩沖溶液的配制方法為：先將143 mL氨水用純凈水稀釋定容至1 L，再用磷酸調(diào)節(jié)pH至9.8。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，所述抗氧化劑在四氫呋喃中的濃度為0.2～1.0g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，所述的抗氧化劑為二丁基羥基甲苯、沒食子酸、沒食子叔丁酯或特丁基對苯二酚中的一種或幾種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，所述的抗氧化劑為二丁基羥基甲苯。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，所述高效液相色譜法采用的色譜條件為：

色譜柱：C18柱

柱溫：30℃

流速：0.6～0.8mL/min

流動相：二氯甲烷：甲醇的體積比為90：10

紫外檢測器檢測波長：472nm

進樣量：5μL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，所述水浴溫度為50～60℃，水浴中超聲時間為15～25 min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，所述含抗氧化劑的四氫呋喃溶液定容后，攪拌的時間為15～25 min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，在用高效液相色譜法檢測前先配制標準曲線溶液，標準曲線溶液的配制方法為：

（1）配制標準貯備液：精密稱取6.0mg番茄紅素標準品置于25ml棕色容量瓶中，先用22.5 ml二氯甲烷溶解，再用甲醇稀釋至刻度線，配制得到0.2mg/mL番茄紅素標準貯備液，瓶中充滿氮氣后密封，置于0℃保存，備用；

（2）配制標準曲線溶液：取上述0.2mg/ml的番茄紅素標準貯備液，用流動相分別配制成濃度為4μg/ml、8μg/ml、12μg/ml、16μg/ml、20μg/ml的標準曲線溶液。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的包埋后的番茄紅素的檢測方法，其特征在于，所述高效液相色譜法分離檢測待測液中的番茄紅素的方法為：將所述標準曲線溶液分別在色譜條件下進樣，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，得到標準曲線方程；將前處理得到的待測液用針式濾膜過濾后，在相同的色譜條件下進樣，經(jīng)反相高效分離色譜柱分離后，由紫外檢測器檢測，通過保留時間對待測樣品進行定性；根據(jù)上述標準曲線方程，利用保留時間和峰面積計算得到待測樣品中番茄紅素的含量。