[發(fā)明專利]一種檢測樣品中卡那霉素濃度的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201911229124.6
• 申請日: 2019-12-04
• 公開（公告）號: CN111307768A
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張敏;喬云帆;胡坪;章弘揚(yáng);王月榮
• 申請（專利權(quán)）人: 華東理工大學(xué)
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/359;G01N21/3577;B82Y15/00
• 代理公司: 上海三和萬國知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31230
• 代理人: 陶芾

本發(fā)明公開了一種快速檢測樣品中卡那霉素的方法，該方法首先將單壁碳納米管與卡那霉素適配體混合，使單壁碳納米管分散在適配體中，再加入甲醇溶液，異丙醇溶液得到碳納米管?卡那霉素適配體復(fù)合物，將復(fù)合物加水或者適配體溶液重新分散得到檢測溶液。利用檢測溶液中的適配體與待測成分特異性結(jié)合的特點(diǎn)，根據(jù)成分與適配體結(jié)合前后樣品近紅外熒光光譜變化，來對目標(biāo)成分含量進(jìn)行測定。本發(fā)明所述卡那霉素檢測方法具有簡單快速，抗干擾能力強(qiáng)等特點(diǎn)，適合于卡那霉素的檢測使用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗生素檢測領(lǐng)域，具體涉及一種卡那霉素的檢測方法。

背景技術(shù)

抗生素是一類重要的基礎(chǔ)藥物，廣泛用于細(xì)菌和其它微生物的抑制和殺滅。

卡那霉素是一種重要的天然抗生素，作為人藥和獸藥廣泛用于金黃色葡萄球菌等革蘭氏陰性菌、陽性菌。卡那霉素的檢測方法，當(dāng)前采用的高效液相色譜法和電化學(xué)法等進(jìn)行檢測。這些方法雖然具有靈敏度高和檢出限低等優(yōu)點(diǎn)，但在檢測過程中需要復(fù)雜的前處理過程，并且不能排除生物樣品的背景干擾。

高效液相色譜盡管具有高靈敏度和很好的選擇性，但其成本較高，分析耗時(shí)較長。因此，十分有必要開發(fā)一種用于檢測卡那霉素的分析方法。

發(fā)明內(nèi)容

因此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供一種前處理簡單，排除生物樣品背景干擾的卡那霉素濃度的檢測方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種檢測樣品中卡那霉素濃度的方法，包括以下步驟：

(1))在單壁碳納米管加入表面活性劑，分散劑和適量卡那霉素適配體配制成溶液，超聲分散，離心，取上清液得到碳納米管分散液；

(2)在步驟(1)得到的碳納米管分散液中加入甲醇的水溶液，充分混合后加入異丙醇溶液，得到沉淀，將沉淀加入純水或者卡那霉素適配體溶液超聲分散得到分散液，即檢測溶液；

(3)將檢測溶液與不同濃度的卡那霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液混合，靜置；

(4)用560nm激發(fā)光激發(fā)，在900nm-1300nm范圍內(nèi)測定樣品的近紅外區(qū)發(fā)射熒光光譜，以卡那霉素濃度為橫坐標(biāo)，熒光強(qiáng)度的變化程度(I-I0)/I0為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(5)在檢測實(shí)際樣品時(shí)，將檢測溶液與樣品溶液混合，靜置，用560nm激發(fā)光激發(fā)，在900nm-1300nm范圍內(nèi)測定樣品的近紅外區(qū)發(fā)射熒光光譜，測定未知樣品溶液的熒光強(qiáng)度的變化程度(I-I0)/I0，將該值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算得到樣品中卡那霉素的含量。

上述步驟(2)中，得到的沉淀為單壁碳納米管-卡那霉素適配體復(fù)合物。通過離心分離的方法得到沉淀。

根據(jù)本發(fā)明的一種檢測樣品中卡那霉素濃度的方法，優(yōu)選的是，在所述的步驟(1)中，所述表面活性劑為脫氧膽酸鈉或者脫氧膽酸鈉溶液；所述單壁碳納米管為單壁碳納米管或者單壁碳納米管溶液。

步驟(1)中，可以將上述的幾種成分分別配制成溶液后混合，或者按照比例將溶質(zhì)混合后配制成溶液。步驟(3)中，優(yōu)選的是，靜置時(shí)間為3-30分鐘。

根據(jù)本發(fā)明的一種檢測樣品中卡那霉素濃度的方法，優(yōu)選的是，所述脫氧膽酸鈉溶液的質(zhì)量濃度為1～5％；所述碳納米管溶液的濃度為0.1～1.0mg/mL。

根據(jù)本發(fā)明的一種檢測樣品中卡那霉素濃度的方法，優(yōu)選的是，步驟(1)所述分散劑為聚丙烯酰胺。

根據(jù)本發(fā)明的一種檢測樣品中卡那霉素濃度的方法，優(yōu)選的是，所述碳納米管與聚丙烯酰胺的質(zhì)量比為0.01:1～0.05:1。

根據(jù)本發(fā)明的一種檢測樣品中卡那霉素濃度的方法，優(yōu)選的是，所述卡那霉素適配體為核酸適配體；所述卡那霉素適配體濃度為100μM。