[發明專利]一種大腸桿菌檢測芯片的制備方法及檢測芯片

在審

• 申請號: 201911215802.3
• 申請日: 2019-12-02
• 公開（公告）號: CN110907643A
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發明（設計）人: 黃昱;謝遠揚;何浩培;張海汐;李學金;李吉業
• 申請（專利權）人: 中國科學院重慶綠色智能技術研究院;香港中文大學（深圳）
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 尹麗云

本發明提出一種大腸桿菌檢測芯片的制備方法及檢測芯片，包括在預選的基底層上設置表面等離子體共振發生單元，所述表面等離子體共振發生單元表面分別采用大腸桿菌適配體和封閉溶液進行修飾，得到檢測芯片；所述表面等離子體共振發生單元包括一層金膜和一層納米金陣列；將所述金膜的一面附著在所述基底層上，所述納米金陣列附著在所述金膜的另一面上；本發明可有效提高大腸桿菌的檢測精度和檢測限。

技術領域

本發明涉及微生物檢測領域，尤其涉及一種大腸桿菌檢測芯片的制備方法及檢測芯片。

背景技術

食源性致病菌是食源性疾病的主要起因。由食源性致病菌引發的疾病給人類造成大量的醫療花費和生產力損失。大腸桿菌O157:H7是目前世界范圍內最重要的食源性致病菌之一。大腸桿菌O157:H7毒性極強，一般認為100～200個大腸桿菌O157:H7就能使人中毒。因此，實現大腸桿菌O157:H7快速、靈敏地檢測，對于預防大腸桿菌O157:H7的暴發傳染和保護人類健康均具有重要的意義。

目前，檢測大腸桿菌O157:H7的常規方法主要包括傳統培養檢測方法、免疫學檢測方法和分子生物學檢測方法。盡管這些方法具有靈敏度高的特點，但許多方法依賴昂貴的儀器設備和熟練的操作人員，且需要復雜的樣品前處理過程。這些方法無法滿足基層及現場快速檢測的需要。因此，建立靈敏、快速、無需昂貴儀器設備的大腸桿菌O157:H7檢測方法對防范食品安全風險具有重要意義。

發明內容

鑒于以上現有技術存在的問題，本發明提出一種大腸桿菌檢測芯片的制備方法及檢測芯片，主要解決現有大腸桿菌檢測成本高且速度慢的問題。

為了實現上述目的及其他目的，本發明采用的技術方案如下。

一種大腸桿菌檢測芯片的制備方法，包括

在預選的基底層上設置表面等離子體共振發生單元，所述表面等離子體共振發生單元表面分別采用大腸桿菌適配體和封閉溶液進行修飾，得到檢測芯片；

所述表面等離子體發生單元包括一層金膜和一層納米金陣列；將所述金膜的一面附著在所述基底層上，所述納米金陣列附著在所述金膜的另一面上。

可選地，所述大腸桿菌適配體包括大腸桿菌O157:H7的核酸適配體。

可選地，在采用所述大腸桿菌適配體修飾所述表面等離子體共振發生單元之前，采用多個腺嘌呤脫氧核苷酸序列對所述大腸桿菌適配體進行修飾。

可選地，所述封閉溶液包含11-巰基十一烷酸，通過所述11-巰基十一烷酸封閉所述表面等離子體共振發生單元表面未與所述大腸桿菌適配體結合的所述金膜表面區域。

可選地，所述基底層與所述等離子發生單元之間通過鉻層粘接。

可選地，組成所述納米金陣列的納米金顆粒粒徑為10-30nm。

可選地，所述納米金陣列的制備方法包括：

采用還原法獲取含納米金顆粒的膠體金溶液；

通過丙烯酰胺對所述膠體金溶液內的納米金顆粒表面進行修飾；

在所述膠體金溶液上形成水-己烷分界面，將納米金顆粒吸引到所述分界面；

通過紫外線照射所述分界面，獲取單層納米金顆粒膜；

將所述納米金顆粒膜移至所述金膜表面形成周期性排列的所述納米金陣列。

可選地，所述金膜厚度為45-50nm。

可選地，所述基底層包括BK7玻璃基底。

一種檢測芯片，所述檢測芯片采用權利要求1至9任一所述的方法制備而成。