[發明專利]硫酸新霉素組分及有關物質的檢測方法

有效

• 申請號: 201911192582.7
• 申請日: 2019-11-28
• 公開（公告）號: CN111024870B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 李志偉;郭宇鵬;趙俊梅;畢海超;張寒;李陽;劉亞平;孫威
• 申請（專利權）人: 河北科技大學;河北省地質環境監測院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 郝曉紅

本發明提供一種硫酸新霉素組分及有關物質的測方法。本發明采用HPLC?ELSD法進行檢測，色譜條件為：色譜柱：ACE C18?PFP，4.6*250mm，3μm；流動相A：0.1?5.0wt％三氟乙酸水溶液，流動相B為甲醇；漂移管溫度為30?100℃，載氣壓力為20?60Psi。本發明提供的檢測方法能夠實現硫酸新霉素組分B和C，以及已知雜質、多個未知雜質之間的有效分離，且本發明提供的方法經專屬性、靈敏度等方法學研究及驗證，發現本發明的方法靈敏、準確、重現性較好，能夠用更為簡便的方法實現對硫酸新霉素中更多雜質的定性和定量，為提高和更好地控制硫酸新霉素產品的質量提供了可靠保障。

技術領域

本發明涉及藥物檢測技術領域，尤其涉及一種硫酸新霉素組分及有關物質的檢測方法。

背景技術

硫酸新霉素，是治療畜禽細菌性腸炎的首選藥物，廣泛應用于治療養殖動物的乳腺炎、角膜炎、結膜炎等疾病，并可作為飼料添加藥物，預防由細菌感染引起的早起損傷和腸炎，提高飼料利用率，促進畜禽生長。

硫酸新霉素屬氨基糖苷類抗生素，硫酸新霉素的主要組分為硫酸新霉素B和硫酸新霉素C，其降解產物主要為新霉胺(雜質A)，具有較嚴重的耳、腎毒性。目前，硫酸新霉素的檢測方法通常采用微生物檢定法、柱前衍生化法、HPLC-PAD、HPLC-CAD和紫外分光光度法。2005版中國藥典收采用微生物檢定法測定硫酸新霉素的含量，用薄層色譜法對硫酸新霉素中的主要雜質硫酸新霉胺進行限度檢查，操作繁瑣，靈敏度欠佳，且沒有對硫酸新霉素中的其他有關物質進行控制，也不能分別測定硫酸新霉素B和硫酸新霉素C兩種組分。柱前衍生法通常采用的衍生化試劑為鄰苯二甲醛、茚三酮等，柱前衍生物不穩定，易發生熒光猝滅，影響檢測結果的因素較多；HPLC-PAD、HPLC-CAD對試驗人員的操作技能要求較高，檢測條件要求苛刻，且檢測成本較高；紫外分光光度法不能準確定量檢測出硫酸新霉素中各雜質的含量。因此，研發一種能夠有效分離硫酸新霉素組分B和C，且盡可能多的檢出硫酸新霉素中有關物質的分析方法，且檢測方法便捷高效，成為提高和更好地控制硫酸新霉素質量的迫切要求。

發明內容

針對現有技術中硫酸新霉素的檢測方法，無法簡便有效地實現多個雜質與硫酸新霉素的有效分離，及硫酸新霉素B和硫酸新霉素C組分之間有效分離的技術問題，本發明提供一種硫酸新霉素組分及有關物質的檢測方法。

為解決上述技術問題，本發明提供的技術方案是：

一種硫酸新霉素組分及有關物質的檢測方法，所述檢測方法為HPLC-ELSD法，其中所述HPLC-ELSD法中HPLC的條件為：

色譜柱：ACE C18-PFP，4.6*250mm，3μm；

流動相A：0.1-5.0wt％三氟乙酸水溶液，流動相B為甲醇，其中，所述流動相A和流動相B的體積比為100:0-70:30；

流速0.1-1.5mL/min；

洗脫方式為等度洗脫；

所述HPLC-ELSD法中ELSD檢測器的條件為：

漂移管溫度為30-100℃；

載氣壓力為20-60Psi。