[發明專利]用于胃癌診斷的CD44v3-v10結構域特異性多肽配體、獲得方法及應用

在審

• 申請號: 201911192474.X
• 申請日: 2019-11-28
• 公開（公告）號: CN110776559A
• 公開（公告）日: 2020-02-11
• 發明（設計）人: 張丹;任牡丹;盧桂芳;盧新蘭;趙艷;和水祥
• 申請（專利權）人: 西安交通大學醫學院第一附屬醫院
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K49/00
• 代理公司: 61223 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 崔瑞迎

本發明屬于藥物開發技術領域，具體涉及一種用于胃癌診斷的CD44v3?v10結構域特異性多肽配體、獲得方法及應用。所述用于胃癌診斷的CD44v3?v10結構域特異性多肽配體的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，為CV?1多肽：THENWPA。所述CV?1多肽能夠特異性結合于CD44的v3?v10變異型外顯子編碼結構域，并通過該腫瘤標志物結合于人胃癌細胞及組織，該CV?1多肽可用于胃癌的分子影像診斷。

技術領域

本發明屬于藥物開發技術領域，具體涉及一種用于胃癌診斷的CD44v3-v10結構域特異性多肽配體、獲得方法及應用。

背景技術

早期診斷是提高胃癌治療水平、降低疾病復發及致死率的重要手段。現有胃癌檢測手法，包括胃鏡、消化道造影、血清腫瘤標志物對于早期胃癌缺乏足夠的靈敏性及特異性。因而開發經濟、便捷、易普及的早期胃癌篩查手段，是許多科學家研究的目標及方向。

傳統影像學，包括內鏡檢查依賴于對病變形態學異常的判斷。隨著疾病相關分子機制研究的成熟以及各種影像技術的發展，出現了基于疾病特異性分子水平的顯像技術。所謂分子影像學，是運用影像學相關手段，顯示組織乃至細胞及亞細胞水平的特定分子，反映分子水平的變化，在影像方面對相關分子的生物學行為進行定性和定量研究。其核心技術在于能夠結合于病變特殊標志物的分子探針，以及能夠檢測探針的顯像平臺。

分子探針一般包括三個要素：可以產生信號被分子影像設備所檢測到的基團、可以優化整個分子藥代動力學的載體以及可以靶向結合檢測目標的親和配體。目前親和配體是分子影像技術開發的主要瓶頸。現在已開發的配體主要包括抗體、改良抗體、多肽、適體以及一些其他小分子。其中僅小分子配體廣泛應用于臨床。但小分子類配體結構簡單，假陽性率過高?？贵w類探針因高度的特異性，成為目前進入臨床試驗最多的探針種類，但該類探針制備保存難度大，費用高，免疫原性及毒性均高，一定程度上制約了其使用。多肽配體與抗體擁有相同的分子基礎，有高度的多樣性，而且低毒低免疫原性、組織穿透力好、易于代謝、價格低廉、易于合成標記，因此也成為探針研究的重要方向。

CD44作為大分子膜蛋白，結構有利于配體在體內與細胞結合，同時還是重要的胃癌腫瘤標記物，其與腫瘤以及胃癌的相關性研究非常成熟。全長CD44包含有10個普通型外顯子及9個變異型外顯子。普通型CD44僅由普通型外顯子構成，記作CD44s，可表達于正常人細胞，完成細胞間與基質連接、促進細胞運動等生理功能(Goodison,S.,V.Urquidi,andD.Tarin,CD44 cell adhesion molecules.Molecular Pathology,1999.52(4):p.189-96)。變異型CD44指具有變異型外顯子的CD44分子，寫作CD44v，其相對于CD44s,在胃癌中的表達具有更高的特異性。CD44的v3至v10的變異型在胃癌中均有較高的表達率。其表達與胃癌多種臨床病理特征、預后及耐藥相關。因此CD44v3-v10特異性多肽配體(探針)，在臨床中具有優良的應用前景。

現有技術中，CD44多肽配體存在的缺陷是：(1)CD44的天然配體透明質酸及其類似物配體，因其存在其他受體分子如RHAMM、TLR4、ICAM1(Orian-Rousseau,V.and H.Ponta,Perspectives of CD44 targeting therapies.Archives of Toxicology,2015.89(1):p.3-14)，缺乏CD44特異性。(2)CD44v6單克隆抗體配體Bivatuzumab，因良好的敏感性及特異性進入臨床試驗階段，但因抗體分子引發的致死性免疫副反應停止應用。(3)由uPA結構設計的CD44多肽配體，目前已進入臨床試驗階段，但該探針不結合于CD44變異型外顯子編碼區，因此腫瘤特異性低。綜上，需要開發一種能夠特異性結合CD44變異型外顯子的、無致死性免疫副反應的多肽配體。

發明內容

為了解決上述技術問題本發明提供了一種用于胃癌診斷的CD44v3-v10結構域特異性多肽配體、獲得方法及應用。