[發(fā)明專利]利用響應(yīng)面法優(yōu)化水提小藍(lán)粉總皂苷的提取方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911191860.7
• 申請日: 2019-11-28
• 公開（公告）號: CN110801465A
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉全宏;王布雷;殷剛
• 申請（專利權(quán)）人: 平利縣神草園茶業(yè)有限公司
• 主分類號: A61K36/424
• 分類號: A61K36/424;A23F3/34;G01N21/31
• 代理公司: 西安利澤明知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 61222
• 代理人: 林兵

本發(fā)明屬于植物提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種利用響應(yīng)面法優(yōu)化小藍(lán)粉總皂苷的提取方法，具體包括(1)制備小藍(lán)粉樣品溶液；(2)使用香草醛?冰醋酸法測定樣品溶液皂苷含量；(3)試驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析；(4)數(shù)據(jù)處理。本發(fā)明方法具有得率高，提取工藝準(zhǔn)確、可靠等優(yōu)點(diǎn)，同時簡單易行，提取成本較低，響應(yīng)面法的采用，保證了最優(yōu)提取條件的科學(xué)性，可以帶來良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種利用響應(yīng)面法優(yōu)化小藍(lán)粉總皂苷的提取方法。

背景技術(shù)

絞股藍(lán)，為葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生草質(zhì)藤本植物，別名五葉參、七葉參等。其最早載于明代的《救荒本草》，此外，《中華本草》、《中藥大辭典》、《全國中草藥匯編》中也均有收錄。絞股藍(lán)具有消炎解毒，止咳祛痰之功效，民間多用于治療慢性支氣管炎，傳染性肝炎，腎炎和腸胃炎等疾病。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明：絞股藍(lán)中所含有的皂苷(Gyp)是其主要的活性成分，Gyp有著和人參皂苷相似的四環(huán)三萜達(dá)瑪型結(jié)構(gòu)，而絞股藍(lán)是除五加科外唯一含有此皂苷資源的植物，因此被冠以“南方人參”美譽(yù)。

Gyp因其具有的抗腫瘤，抗氧化，抗衰老，抗炎及免疫調(diào)節(jié)等一系列生物活性而備受研究者青睞,依照相似相溶原理，學(xué)者主要以乙醇回流提取Gyp,如中國專利CN201810458420.2公布了一種提取絞股藍(lán)總甙的方法，包括藥材的粉碎，乙醇浸提和大孔樹脂純化,其中乙醇浸提是其中關(guān)鍵步驟,然而，乙醇的引入一方面提高了皂苷的生產(chǎn)成本，另一方面也帶來了有機(jī)試劑的污染,而且目前絞股藍(lán)資源的開發(fā)主要以茶飲料為主，其茶湯本質(zhì)為絞股藍(lán)的水提取物，理論研究與實(shí)際應(yīng)用存在較大脫節(jié)。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供一種利用響應(yīng)面法優(yōu)化小藍(lán)粉總皂苷的提取方法，首次以絞股藍(lán)總皂苷得率為指標(biāo)，提高絞股藍(lán)茶中的皂苷總含量其包括以下步驟：

S1：制備小藍(lán)粉樣品溶液；

S2：使用香草醛-冰醋酸法測定樣品溶液皂苷含量；

S201：以絞股藍(lán)皂苷標(biāo)準(zhǔn)品為對照繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程；

S202：將小藍(lán)粉樣品溶液的吸光值代入上述回歸方程中計(jì)算出皂苷濃度，然后代入以下公式得到皂苷得率：

皂苷得率(％)＝樣品液中皂苷濃度×樣品液體積×稀釋倍數(shù)/初始絞股藍(lán)質(zhì)量/1000×100；

S3：試驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析；

S301：以步驟S202中皂苷得率為指標(biāo)依次考察液料比、提取時間、提取溫度這些單因素對皂苷得率的影響；

S302：在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，以絞皂苷得率為響應(yīng)值，以料液比、提取時間和提取溫度三個因素為自變量，設(shè)計(jì)三因素三水平響應(yīng)面試驗(yàn)，分析小藍(lán)粉皂苷的最佳提取工藝條件；

S4：數(shù)據(jù)處理：以皂苷得率為得率優(yōu)化提取工藝，通過對液料比、提取時間和提取溫度三因素的多元回歸和二項(xiàng)擬合建立回歸方程，得到二維和三維響應(yīng)面圖，再通過對試驗(yàn)結(jié)果的分析，確定小藍(lán)粉皂苷的最佳提取工藝范圍。

作為上述方案的進(jìn)一步說明，所述步驟S301中各因素對皂苷得率影響的大小為提取溫度＞料液比＞提取時間。

作為上述方案的進(jìn)一步說明，所述步驟S302中分析的最佳提取工藝范圍為：液料比30:1～50:1ml/g、提取時間60～120min、提取溫度50～70℃。

作為上述方案的進(jìn)一步說明，所述步驟S4中，確定的最佳提取工藝為：液料比45ml/g，提取時間105min，提取溫度70℃。

本發(fā)明的有益效果：