[發(fā)明專利]一種鈾酰離子的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911180266.8
• 申請(qǐng)日: 2019-11-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110819697B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-03-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 云雯;吳虹;尤琳烽;熊政委
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶工商大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6816
• 分類號(hào): C12Q1/6816
• 代理公司: 南京中律知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32341
• 代理人: 沈振濤

1.一種溶液中鈾酰離子濃度的檢測(cè)方法，包括如下步驟：

(1)制備金納米粒子；

(2)用所述金納米粒子修飾DNA序列4，DNA序列4一端硫醇化，另一端連接熒光基團(tuán)，其中，所述DNA序列4具體為：HS-TACCCAAAAAACCTGGCTGCAACTCACTATrAGGAAGAGATGGACGTGACATACGG TACAAAAACCCTA-FAM；

(3)用步驟(2)所得金納米粒子修飾的DNA序列4制備DNA鑷子探針；

(4)將步驟(3)所得DNA鑷子探針、適量鈾酰離子特異性DNA酶鏈、待測(cè)鈾酰離子樣品溶液混合，其中所述鈾酰離子特異性DNA酶鏈具體為：CACGTCCATCTCTGCAGTCGGGTAGTTAAACCGACCTTCAGACATAGTGAGT；

(5)檢測(cè)步驟(4)所得溶液的熒光信號(hào)，并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣品溶液中鈾酰離子的濃度，

其中，步驟(3)中與DNA序列4一起制備DNA鑷子探針的還有DNA序列1-3，其中DNA序列1為：TAGGCTTCGTAAGGTCCACATACATACATACACCAGCGAGAATGTTCCGT，DNA序列2為：TAGGGTTTTTGTACCGTACCGACGGAACATTCTCGCTGG，DNA序列3為：TGGACCTTACGAAGCCTAACTAGCCAGGTTTTTTGGGTA。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)具體為：將硫醇化的DNA序列4與金納米粒子以1：1的摩爾比混合12小時(shí)，得到金納米粒子修飾的DNA序列4。

3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于步驟(3)具體為：通過(guò)在pH 5.5的100mMMES緩沖溶液和300mM NaCl中混合100nM的DNA序列1-4，然后將混合物加熱至95℃，并緩慢冷卻以形成DNA鑷子探針。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于步驟(4)具體為：將30nM鈾酰離子特異性DNA酶鏈和待測(cè)鈾酰離子溶液與DNA鑷子在含300mM NaCl的10mM的pH 5.5的MES緩沖溶液中混合，然后在40℃下孵育60分鐘。

5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于步驟(5)中熒光信號(hào)為492nm激發(fā)下500nm至600nm測(cè)量的熒光信號(hào)。