[發明專利]新型EED-EZH2相互作用小分子抑制劑的確定和評價

在審

• 申請號: 201911177340.0
• 申請日: 2019-11-26
• 公開（公告）號: CN110950834A
• 公開（公告）日: 2020-04-03
• 發明（設計）人: 張華;劉凱璐;閆薛;朱孔凱
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: C07D333/22
• 分類號: C07D333/22;A61K31/381;A61P35/00
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 趙鳳

本發明涉及圖1所示的化合物35作為靶向EED底部的EED?EZH2相互作用小分子抑制劑的用途，及其在制備預防和/或治療惡性淋巴瘤的藥物中的用途。所述惡性淋巴瘤為彌漫性大B細胞淋巴瘤相關的疾病。

技術領域

本發明屬于醫藥領域，涉及圖1所示的化合物35作為EED-EZH2相互作用的小分子抑制劑的用途及其在制備預防和/或治療惡性淋巴瘤的藥物中的用途。

背景技術

組蛋白的甲基化是介導多種基本細胞過程的重要表觀遺傳修飾之一。多梳抑制復合物2 (Polycomb Repressive Complex 2，即PRC2)具有組蛋白甲基轉移酶活性，可催化組蛋白H3第27位賴氨酸的三甲基化，在胚胎發育、干細胞可塑性和細胞分化等多種生物學進程中發揮重要的調節作用。PRC2由E2H2、EED和SUZ12三個關鍵亞基構成，E2H2是催化亞基，與EED和SUZ12形成復合物后發揮作用，EED或SUZ12的缺失都會使PRC2失活。

大量研究表明，PRC2核心組分的活性異常與多種疾病密切相關，尤其是惡性腫瘤的侵襲、發生和發展。在多種人類癌癥中，如乳腺癌、前列腺癌、肝癌、大腸癌、神經膠質瘤、淋巴瘤，EZH2、EED和SUZ12表達水平顯著升高，而EZH2的下調可以顯著抑制這些腫瘤細胞的增殖。因此，PRC2是一種非常有前景的抗腫瘤靶點。

靶向EZH2或EED-EZH2蛋白-蛋白相互作用(PPI)是目前研發PRC2抑制劑的兩種策略。在已報道的EZH2抑制劑中，GSK126、EPZ6438和CPI-1205已進入臨床試驗。然而，一方面，由于EZH2抑制劑直接作用于其天然底物S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的結合位點，而人體內超過50種甲基轉移酶中都有類似的SAM結合口袋，因而，需要花費大量的實驗資源去檢測化合物對其他同源蛋白的選擇性；另一方面，EZH2需要與EED和SUZ12形成復合物后才能發揮催化活性，因而，通過抑制EZH2與其輔助蛋白（如EED）的相互作用也可以抑制EZH2的催化活性，同時，由于EZH2蛋白-輔助蛋白相互作用位點的特異性遠高于其與SAM結合位點的特異性，故靶向蛋白-蛋白相互作用的位點抑制劑可以解決該化合物的選擇性難題。2013年，哈佛醫學院的WoojinKim等人根據EZH2與EED的復合物晶體結構，設計合成了一種EZH2環肽類化合物(stapled peptide)，選擇性抑制EZH2與EED的結合，促進PRC2多個組分的降解，進而抑制其甲基轉移酶活性。相比EZH2抑制劑，該環肽類化合物不僅對依賴EZH2催化活性的腫瘤細胞有殺傷作用，更重要的是，對一些雖然依賴EZH2但是不依賴其甲基轉移酶活性的腫瘤細胞（如基底樣惡性乳腺癌、雄激素抵抗性惡性前列腺癌等）具有明顯的增殖抑制作用，因而，極大地擴大了PRC2復合物抑制劑的應用范圍。然而，由于多肽類化合物通常存在細胞滲透能力低、代謝穩定性差和制備昂貴等缺點，其在臨床上的使用受到了嚴重的制約。與此相反，小分子化合物具有通透性好、代謝穩定性高和制備難度低等特點，有效彌補了多肽類化合物的不足。因此，特異性靶向EED-EZH2相互作用的高活性、高成藥性小分子抑制劑具有更廣闊的臨床應用前景，可以為多種依賴于EZH2的惡性腫瘤的治療提供有力的理論支撐。

EED與EZH2的相互作用界面（頂部和底部）均可以作為PPI抑制劑的靶點。諾華制藥公司的研究員已經發現了多個靶向EED頂部的PPI抑制劑并確定了共晶復合物結構，而目前，靶向EED底部的PPI抑制劑卻很少。

綜上所示，本領域迫切需要開發靶向EED底部的PPI小分子抑制劑。

發明內容

本發明的發明人為解決上述難題，通過虛擬篩選結合生物學評價，發現了一種靶向EED底部的新型EED-EZH2相互作用小分子抑制劑，并測定了其對彌漫性大B細胞淋巴瘤細胞系Toledo細胞的抗增殖活性。由此本發明的一個目的在于提供一種新型EED-EZH2相互作用小分子抑制劑——化合物35，如圖1所示。

本發明的另一個目的在于提供圖1所示的化合物35在制備預防和/或治療惡性淋巴瘤的藥物中的用途。