[發明專利]一種醇脫氫酶突變體及其應用

有效

• 申請號: 201911175255.0
• 申請日: 2019-11-26
• 公開（公告）號: CN110982799B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 倪曄;戴威;許國超;周婕妤;韓瑞枝;董晉軍
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/18;C12P17/12;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

1.一種醇脫氫酶突變體，其特征在于，所述醇脫氫酶突變體是通過將出發氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的醇脫氫酶的第36位賴氨酸突變為異亮氨酸、第132位蘇氨酸突變為天冬氨酸、第159位天冬酰胺突變為天冬氨酸、第210位賴氨酸突變為谷氨酸、第248位蘇氨酸突變為丙氨酸和第272位谷氨酰胺突變為亮氨酸得到的。

2.編碼權利要求1所述醇脫氫酶突變體的基因。

3.攜帶權利要求2所述基因的重組質粒。

4.如權利要求3所述的重組質粒，其特征在于，所述重組質粒的載體為pET-28a(+)質粒、pET-28b(+)質粒或pET-20b(+)質粒。

5.攜帶權利要求2所述基因或權利要求3或4所述重組質粒的宿主細胞。

6.權利要求1所述醇脫氫酶突變體的制備方法，其特征在于，所述方法為將權利要求5所述的宿主細胞接種至發酵培養基中進行發酵，獲得發酵液；將發酵液進行離心，收集菌體；將菌體進行破碎后離心，獲得細胞破碎上清液；將細胞破碎上清液進行提取，獲得權利要求1所述的醇脫氫酶突變體。

7.一種生產手性雙芳基醇的方法，其特征在于，所述方法為將權利要求1所述的醇脫氫酶突變體添加至含有潛手性雙芳基酮的反應體系中進行反應，得到反應液；將反應液進行提取，獲得手性雙芳基醇。

8.如權利要求7所述的一種生產手性雙芳基醇的方法，其特征在于，所述反應體系中還含有輔酶和輔酶循環系統；所述輔酶循環系統含有D-葡萄糖和葡萄糖脫氫酶，或者，含有亞磷酸鹽和亞磷酸鹽脫氫酶，或者，含有甲酸和甲酸脫氫酶，或者，含有乳酸和乳酸脫氫酶，或者，含有甘油和甘油脫氫酶。

9.權利要求1所述醇脫氫酶突變體，或權利要求2所述基因，或權利要求3或4所述重組質粒，或權利要求5所述宿主細胞，或權利要求6所述制備方法在生產手性雙芳基醇中的應用。