[發明專利]一種利用果渣制備低甲氧基果膠的方法

在審

• 申請號: 201911165097.0
• 申請日: 2019-11-25
• 公開（公告）號: CN110699402A
• 公開（公告）日: 2020-01-17
• 發明（設計）人: 陳小舉
• 申請（專利權）人: 巢湖學院
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12N1/14;C08B37/06;C12R1/685
• 代理公司: 32251 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 王華

1.一種利用果渣制備低甲氧基果膠的方法，其特征在于：包括下列步驟：

步驟1：向黑曲霉菌種保藏斜面加入無菌水，用接種鏟將斜面中的孢子刮下，制成菌種懸液；按2.5-5%的接種量將菌種懸液接入滅菌后的液體種子培養基中，在溫度30-35℃、轉速100-200r/min的搖床中培養4-6d，得到黑曲霉液體種子；

步驟2：在空氣潔凈級別為1萬級的凈化環境中，在25-30℃條件下，按1-5%的接種量，將黑曲霉液體種子與蒸汽滅菌后的固體培養基混合均勻，然后鋪設成1.5-2.5cm厚度的淺盤，保持環境相對濕度60-75%，發酵5-7d，得到固體發酵產物；

步驟3：向固體發酵產物中添加固體培養基質量9-12倍的蒸餾水，浸泡后過濾，得到的濾液即為粗酶液；在25±5℃溫度條件下，向粗酶液中加入硫酸銨，靜置后過濾得到沉淀物，將沉淀物用純化水清洗，即得黑曲霉發酵得到的復合酶；

步驟4：向果渣中添加其4-5倍質量的純化水，然后添加果渣質量0.5-1.0%的步驟3制得的復合酶，保持溫度40-45℃、以轉速45-60r/min攪拌處理60-90min，得到果渣混合液；

步驟5：向果渣混合液中加入鹽酸，調節pH值至2.0-2.5，然后升溫并保持溫度90-92℃、以轉速30-60r/min攪拌處理60-90min；獲得的溶液過濾后得到的濾液為果膠提取液；

步驟6：向果膠提取液中加入乙醇，使混合液的乙醇的質量百分比含量為50-65%，靜置60-90min；將混合液采用60-80目濾網過濾，收集固體截留物；

步驟7：將固體截留物采用純化水反復清洗3-5次，然后將固體截留物在真空表壓-0.09～-0.10MPa、溫度60-65℃環境下烘干至含水量小于或等于5%，粉碎后即得到低甲氧基果膠。

2.根據權利要求1所述的利用果渣制備低甲氧基果膠的方法，其特征在于：所述果渣為黃桃、梨、蘋果、藍莓、橙和柚子鮮果中的至少一種，榨取果汁后獲得的殘渣。

3.根據權利要求1所述的利用果渣制備低甲氧基果膠的方法，其特征在于：所述液體種子培養基的原料配方包含下列質量百分比的原料：25-30%蔗糖、0.25-0.50%硫酸銨、0.15-0.25%磷酸氫二鉀、0.15-0.25%氯化鈉、0.05-0.10%硫酸亞鐵，其余為純化水，共計100%。

4.根據權利要求1所述的利用果渣制備低甲氧基果膠的方法，其特征在于：所述固體培養基的原料配方包含下列質量百分比的原料：40-50%果渣、10-15%麩皮、10-15%玉米粉、5%豆粕、0.5%硫酸銨、0.25%磷酸氫二鉀，共計100%；所述固體培養基的制備方法包括：按照所述固體培養基的原料配方稱取原料并混合混勻，裝入無紡布袋中，使用120-125℃飽和蒸汽滅菌25-30min，然后在空氣潔凈級別為1萬級的凈化環境中自然放涼至室溫，備用。