[發明專利]一種孕馬血清促性腺激素粗品提取過程中懸浮液的固液分離方法

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• 申請號: 201911156676.9
• 申請日: 2019-11-22
• 公開（公告）號: CN110938135A
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 俞通泰;沙樂;龍昌偉;李浩光
• 申請（專利權）人: 甘肅天祁生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/59
• 分類號: C07K14/59;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 寧波市鄞州盛飛專利代理事務所(特殊普通合伙) 33243
• 代理人: 王玲華;洪珊珊

本發明的孕馬血清促性腺激素粗品提取過程中懸浮液的固液分離方法。包括如下步驟：S1、取孕馬血清，加偏磷酸溶液1調pH至3.0?3.8，得偏磷酸/孕馬血清混懸液；S2、將偏磷酸/孕馬血清混懸液泵入板框壓濾機中，板框壓濾機裝有經預處理的過濾紙板，固液分離后得到蛋白清液。步驟S2中過濾紙板的預處理包括以下步驟：將過濾紙板浸泡在0.05?0.2％(m/v)的偏磷酸溶液2中50?100min，瀝干后裝入板框壓濾機。本發明采用板框壓濾機代替傳統的沉降式離心機，解決了孕馬血清生產PMSG過程中“偏磷酸/孕馬血清混懸液”大規模進行固液分離的瓶頸。具有勞動強度小、工作效率高、能量消耗少、PMSG收率和活性高等優點。

技術領域

本發明屬于孕馬血清促性腺激素粗品生產技術領域，具體涉及一種孕馬血清促性腺激素粗品提取過程中懸浮液的固液分離方法。

背景技術

孕馬血清促性腺激素(簡稱PMSG)是孕中母馬尿囊絨毛膜細胞分泌的糖蛋白類促性腺激素。PMSG具有類似促卵泡素(FSH)和促黃體素(LH)的雙重活性，但以FSH的作用為主，具有明顯的促卵泡發育作用；同時，也有一定的促排卵和黃體形成的功能，對雄性動物具有促使精細管發育和性細胞分化的功能。實踐上，PMSG可以調控母畜同期發情，實現可控同步批次化生產，并縮短配種時間、降低不孕概率、提高繁殖效率。目前，PMSG已經廣泛應用于動物的誘導發情、同期發情，超數排卵或增加排卵率；同時對卵巢發育不全或雄性生精能力衰退等也有良好的療效。

PMSG生產的原料為采自于懷孕40-120天的母馬血清，經典的提取方法是：首先用偏磷酸(HPO₃)與血清進行“偏磷酸-蛋白”反應，使血清中的雜蛋白沉淀，再進行固液分離得到清液；然后用乙醇與清液進行“乙醇-蛋白”分級，使血清中部分雜蛋白沉淀，再進行固液分離得到清液，最后用乙醇沉淀蛋白得到PMSG粗品。

小規模的PMSG生產過程中，固液分離方法都是采用沉降式離心分離法。由于“偏磷酸-蛋白”反應的混懸液含固量高達9％以上，實踐中，如果使用管式離心機分離，由于其轉鼓體積小，容固量有限，對于含固量高的物料，生產操作過程中需要頻繁卸料和清洗，工作效率低下；另外由于血漿蛋白形成的混懸液中顆粒的特殊性，碟式離心機也無法解決“偏磷酸-蛋白”反應形成的混懸液的固液分離問題，所得“清液”仍然很混濁。且隨著集約化、規?；母咝竽翗I的發展，市場對PMSG的需求量大幅提升，孕馬血漿的日加工能力需要從100kg上升到2000kg，傳統的沉降式離心方法已經不能滿足血漿提取中的固液分離，尋求大規模固液分離方法及設備成為必然。

發明內容

本發明針對現有技術中PMSG制備過程中出現的問題，提供一種使用板框壓濾機替代沉降離式離心機進行混懸液的大規模料液固液分離，解決了孕馬血漿生產PMSG過程中進行固液分離的瓶頸，極大提高了工作效率、降低了能耗，同時節約了工藝時間，對保有PMSG的生物活性起到了積極的作用。

本發明的以上目的通過以下技術方案來實現：

一種孕馬血清促性腺激素粗品提取過程中懸浮液的固液分離方法，包括如下步驟：

S1、取孕馬血清，加偏磷酸溶液1調pH至3.0-3.8，得偏磷酸/蛋白混懸液；

S2、將偏磷酸/蛋白混懸液泵入板框壓濾機中，板框壓濾機裝有經預處理的過濾紙板，固液分離后得到蛋白清液A；

作為優選，步驟S2中過濾紙板的預處理包括以下步驟：將過濾紙板浸泡在偏磷酸溶液2中50-100min，瀝干后裝入板框壓濾機。

作為優選，所述偏磷酸溶液2的質量濃度為0.05-0.2％(m/v)。

作為優選，步驟S1中所述偏磷酸溶液1的質量濃度為2-8％(m/v)。

作為優選，加偏磷酸溶液1調pH至3.5。