[發(fā)明專利]一種魚膠原蛋白的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911151753.1
• 申請(qǐng)日: 2019-11-22
• 公開（公告）號(hào): CN110818791B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 安信生;裘耀東;唐治國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南生命元特醫(yī)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/78
• 分類號(hào): C07K14/78;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 蘇州根號(hào)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32276
• 代理人: 仇波

1.一種魚膠原蛋白的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟S1、魚鱗前處理：將魚磷加入含有白醋和食鹽的水中在35℃下浸泡軟化2小時(shí)，后加入酸性脫脂清洗液進(jìn)行漂洗20分鐘，再加入堿性脫脂清洗液進(jìn)行漂洗15分鐘，然后用蒸餾水漂洗至中性，再將魚鱗細(xì)切，用乙醇洗滌3次，放入攪拌機(jī)中攪拌，用含4mol/L NaCl的0.03mol/L Tris-HCl緩沖液洗滌1小時(shí)，最后離心取沉淀；所述魚磷、白醋、食鹽、水、酸性脫脂清洗液、堿性脫脂清洗液的質(zhì)量比為1:0.4:0.3:20:8:10；所述酸性脫脂清洗液是由如下重量份的各原料制成：甘草酸10份、檸檬酸15份、乙二胺四乙酸鹽5份、椰油酸二乙醇酰胺0.7份、水120份；所述堿性脫脂清洗液是由如下重量份的各原料制成：煙堿15份、二丙二醇30份、油酸鈉5份、椰油酰胺丙基甜菜堿0.7份、水120份；

步驟S2、提取：將經(jīng)過步驟S1制備得到的魚鱗加入提取液中，在45℃進(jìn)行剪切提取，使魚鱗粒徑達(dá)到50μm，后旋蒸除去提取液，得到粗提取物，再向粗提取物中加入是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%的氯化鈉溶液和0.5mol/L的冰醋酸，攪拌1小時(shí)，后加入脫色劑進(jìn)行脫色脫腥，取上清液，得到提取原液；所述魚鱗、提取液的質(zhì)量比為1:30；所述粗提取物、氯化鈉溶液、冰醋酸的質(zhì)量比為1:30:15；所述提取液為乙醇；所述脫色劑為殼聚糖；

步驟S3、提純、后處理：在經(jīng)過步驟S2制備得到的提取原液中緩慢加入4mol/L?碳酸鈉調(diào)節(jié)pH值到7，離心除掉沉淀物，后將剩余的溶液裝入透析袋，分別用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%、0.01%的乙酸溶液各透析1d，再用蒸餾水透析2d，每天換透析液兩次，最后得到的是純度較高的魚膠原蛋白水溶液；純化的膠原蛋白水溶液采用低溫冷凍干燥法制備成純魚膠原蛋白樣品。