[發明專利]一種益氣補血片中黃芪甲苷含量測定方法

在審

• 申請號: 201911148671.1
• 申請日: 2019-11-21
• 公開（公告）號: CN110967422A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 孫艷濤;趙磊;昝珂;王路宏;張進;李文君;盧鳳琴
• 申請（專利權）人: 吉林師范大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 吉林省長春市新時代專利商標代理有限公司 22204
• 代理人: 曲德鳳

本發明涉及一種益氣補血片中黃芪甲苷含量測定方法。制備方法，步驟1對照品溶液的配制，步驟2含量測定供試品溶液的制備，步驟3色譜條件，步驟4測定。本發明建立的樣品前處理方法簡化操作步驟，采用高效液相色譜法，流動相為乙腈?水，采用十八烷級硅膠色譜柱，蒸發光散射檢測器。所述方法與現有技術相比，方法簡單、準確、重現性和穩定性好，檢測成本低，檢測結果分析快速，可更有效地控制該藥的黃芪甲苷含量。

技術領域

本發明涉及益氣補血片質量標準檢測方法，具體涉及一種益氣補血片中黃芪甲苷的液相色譜分析方法。

背景技術

益氣補血片處方是由黃芪、人參、當歸、大棗、制何首烏、陳皮等組成，具有益氣補血，健脾滋腎。用于原發性血小板減少性紫癜屬氣血兩虛證候者，癥見皮下散在出血點，或兼見齒衄、鼻衄、神疲乏力，頭暈目眩，心悸氣短，食少納呆，面色蒼白，舌淡，脈細無力等。黃芪具有補氣升陽，固表止汗，生津養血。用于氣虛乏力，表虛自汗，氣虛水腫，內熱消渴，血虛萎黃等作用，黃芪中的主要成分黃芪甲苷能增強機體免疫力、提高機體的抗病能力。而黃芪為益氣補血片的君藥。因此，檢測黃芪甲苷的含量能有效的控制益氣補血片的質量。

益氣補血片收載于《國家藥品標準新藥轉正標準第四十二冊》第36頁，該標準的含量測定方法為取本品20片，除去糖衣，研細，稱取約2g，精密稱定，置索氏提取器中，加氯仿50ml，回流提取2小時，棄去氯仿液，殘渣揮干溶劑，加甲醇60ml，回流提取至無色。提取液回收甲醇至干，殘渣加水20ml，微熱使溶解，以水飽和的正丁醇提取5次，每次30ml，合并正丁醇提取溶液，用氨試液提取3次，每次50ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸干，殘渣加水5ml，加熱使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱(內徑1.5cm，長12cm)，以水50ml洗脫，棄去水液，再用40％乙醇30ml洗脫，棄去40％乙醇洗脫液，繼以70％乙醇洗脫60ml，收集洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉移至2ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄ⅥB)試驗，精密吸取供試品溶液6μl，對照品溶液2μl與4μl，分別交叉點于同一高效硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13:6:2)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加熱至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄ⅥB薄層掃描法)進行掃描，波長：λs＝530nm，λR＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。

由于中成藥處方組成不同，化學成分復雜，導致測定方法不同，而黃芪甲苷分離測定均操作較復雜。而益氣活血片質量標準中的測定過程操作繁瑣，分離黃芪甲苷經過多次提取，過柱色譜，采用薄層展開，進行雙薄層掃描測定。操作過程復雜，測定誤差會加大，且雙薄層掃描測定，穩定性及重現性差。

發明內容

本發明的目的是要提供一種益氣補血片中黃芪甲苷含量測定方法，該方法簡單、準確、重現性和穩定性好，檢測成本低，檢測結果分析快速。

本發明的技術方案：

(1)對照品溶液的配制

取5.30mg的黃芪甲苷對照品，精密稱重，置10ml容量瓶中，加甲醇溶液，稀釋至刻度，得對照品溶液，備用。

(2)含量測定供試品溶液制備

取本品20片，除去糖衣，研細，精密稱取2.0094g，置索氏提取器中，加入甲醇100-150ml，加熱回流提取3小時，提取液采用旋轉蒸發儀旋干，殘渣加水30ml，超聲5分鐘使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取5次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次40ml，正丁醇液采用旋轉蒸發儀旋干，殘渣中精密加入甲醇10ml振搖使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

(3)色譜條件