[發明專利]海洋青霉倍半萜內酯抗腫瘤活性物質及制備和用途

有效

• 申請號: 201911144028.1
• 申請日: 2019-11-20
• 公開（公告）號: CN110872266B
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 張治針;馬明珠;葛恒菊;連曉媛
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D307/92
• 分類號: C07D307/92;A61P35/00;C12N1/14;C12P17/04;C12R1/80
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

本發明提供一種海洋青霉倍半萜內酯抗腫瘤活性物質及制備和用途，所述海洋青霉倍半萜內酯為青霉倍半萜內酯A。本發明利用源自海洋沉積物中的朱黃青霉的大米培養制備獲得青霉倍半萜內酯A，朱黃青霉，分類命名為Penicillium minioluteum ZZ1657。所述青霉倍半萜內酯A顯著抑制腫瘤細胞的增殖，具有降低腫瘤細胞葡萄糖消耗和乳酸生成從而抑制腫瘤細胞的異常糖酵解代謝途徑的作用機制，在制備抗腫瘤藥物方面具有應用前景。青霉倍半萜內酯A的化學結構式為：

技術領域

本發明屬醫藥領域,涉及從海洋朱黃青霉Penicillium minioluteum ZZ1657的代謝產物中獲得的海洋青霉倍半萜內酯，尤其涉及海洋青霉倍半萜內酯抗腫瘤活性物質，以及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應用。所述海洋青霉倍半萜內酯為海洋青霉倍半萜內酯A(Penicisesquiterpenoid A)。

背景技術

腫瘤是一類世界范圍內嚴重威脅人類健康的最常見、最嚴重也是最難以有效治療的重大疾病之一。臨床上通過手術，結合放療和藥物是目前腫瘤治療最為常見的方法。藥物治療在腫瘤的預防和治療中具有重要的意義。但是，傳統的抗腫瘤化療藥多有療效有限、毒副作用大和嚴重耐藥性的不足。盡管分子靶向藥物為腫瘤的治療開辟了新途徑，但是，也存在療效有限和容易產生耐藥性的嚴重問題。顯然，臨床上需要療效更好、安全性更高和作用機制獨特的新型抗腫瘤藥物。

海洋特殊的物理化學環境以及生物多樣性和復雜性,迫使海洋微生物具有與陸地微生物不同的新陳代謝途徑、生存繁殖方式和適應機制，因而產生許多陸地微生物無法產生的化學結構新穎和生物活性獨特的代謝產物，是發現抗腫瘤藥或藥物先導化合物的重要資源。

腫瘤細胞代謝重編程為新型抗腫瘤藥物的研究與開發提供了新靶標。大量研究證明，腫瘤細胞高葡萄糖的消耗和高乳酸的生成是腫瘤細胞異常糖酵解的重要特性，活性物質對腫瘤細胞葡萄糖消耗和乳酸生成的改變可反映其對腫瘤細胞異常糖酵解代謝途徑的影響。降低腫瘤細胞葡萄糖的高消耗和乳酸的高生成就可抑制腫瘤細胞的異常糖酵解代謝途徑，從而抑制腫瘤細胞的增殖和生長。

發明內容

本發明的第一個目的是提供一種海洋青霉倍半萜內酯抗腫瘤活性物質，具體為青霉倍半萜內酯A(Penicisesquiterpenoid A),其化學結構式為：

本發明的第二個目的是提供青霉倍半萜內酯A的制備方法，通過以下步驟實現：

(1)朱黃青霉的分離培養

取空氣干燥的海底沉積物用滅菌自來水稀釋成一定的濃度，取一定量的樣品稀釋液均勻分散到含有固體培養基的培養皿中，在室溫條件下培養一定時間后,將不同的菌落分別轉移到另一含有固體培養基的培養皿中，在室溫條件下繼續培養一定時間。最后將ZZ1657的單一菌落接種到斜面培養基培養后置4℃冰箱保存備用。

所述的海底沉積物是從浙江省舟山市枸杞島附近的海域(30°29′9N和122°59′52E)獲得；所述樣品稀釋液的濃度為1×10^-4～1×10^-2g/mL；所述樣品稀釋液的取樣量為200μL；所述培養皿和斜面培養的固體培養基均為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基；所述的室溫培養溫度為20～30℃；所述的培養時間為6～10天。

(2)朱黃青霉的菌種鑒定

上述步驟(1)分離培養所獲得的菌株ZZ1657用目前實驗室普遍使用的內轉錄間隔區(Internal Transcribed Spacer,ITS)DNA序列分析方法鑒定其種類，確定為朱黃青霉，分類命名為Penicillium minioluteum ZZ1657，已被中國典型培養物保藏中心-武漢中心保藏，保藏編號:CCTCC NO：M 2019906，保藏日：2019.11.8；保藏地址：中國.武漢.武漢大學。