[發明專利]一種高地芽孢桿菌J54及其應用

有效

• 申請號: 201911143373.3
• 申請日: 2019-11-20
• 公開（公告）號: CN110713957B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 馬俊紅;盧燦華;蓋曉彤;雷麗萍;莫笑晗;余清;姜寧;夏振遠
• 申請（專利權）人: 云南省煙草農業科學研究院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A24B3/12;A24B15/18;C12R1/07
• 代理公司: 昆明知道專利事務所(特殊普通合伙企業) 53116
• 代理人: 姜開俠;姜開遠

1.一株高地芽孢桿菌J54，其特征在于，所述高地芽孢桿菌為高地芽胞桿菌（Bacillus altitudinis）J54，已在中國典型培養物保藏中心保藏，其保藏編號為CCTCC No.M2019667。

2.一種根據權利要求1所述高地芽孢桿菌J54的應用，其特征在于，所述高地芽孢桿菌在煙草特有亞硝胺定向降解中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述高地芽孢桿菌在煙草特有亞硝胺定向降解中的應用包括發酵、接種和降解步驟，具體包括：

A、發酵：將高地芽孢桿菌（Bacillus altitudinis）J54接種到斜面培養基上于溫度30℃下培養48h得到發酵種子；將發酵種子接種到種子培養液中于溫度30℃下培養48h得到發酵菌劑，接種量為1v/v%，搖瓶裝液量為10~15v/v%；

所述斜面培養基以g/L計包括胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 5g/L、瓊脂15.0g/L，余量為水，pH 7.4；

所述種子培養液成分以g/L計包括胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 5g/L，余量為水，pH 7.4；

B、接種：在煙葉調制或制絲過程中，將發酵菌劑按照煙葉或煙絲重量的3~5%進行噴施；

C、降解：噴施過發酵菌劑的煙葉或煙絲需保持4~7天的降解時間，即可實現煙葉或煙絲中N-亞硝基去甲基煙堿、4-(N-亞硝基甲基氮)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮、N-亞硝基假木賊堿和N亞硝基新煙草堿的有效降解。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述發酵菌劑的有效活菌數為1×10⁹~1×10¹⁰個/mL。

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，C步驟所述降解對于在調制前接種的煙葉無需設定特殊降解條件，對于在制絲過程中接種的煙絲需調節煙絲的水分含量為30~40%，并于25~35℃的條件下保持5天的降解時間。

6.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，C步驟所述降解在噴施過發酵菌劑的煙葉或煙絲保持4~7天的降解時間后，煙葉或煙絲中N-亞硝基去甲基煙堿、4-(N-亞硝基甲基氮)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮、N-亞硝基假木賊堿和N亞硝基新煙草堿的總降解率為5.2~46.6%。