[發(fā)明專利]一種星點設計－效應面法優(yōu)化豬心血拌丹參最佳炮制工藝

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911137923.0
• 申請日: 2019-11-20
• 公開（公告）號: CN110693943A
• 公開（公告）日: 2020-01-17
• 發(fā)明（設計）人: 龔千鋒;于歡;嚴麗萍;陽強
• 申請（專利權）人: 江西中醫(yī)藥大學
• 主分類號: A61K36/537
• 分類號: A61K36/537;G01N30/02
• 代理公司: 34147 合肥律眾知識產權代理有限公司
• 代理人: 王雷

1.一種星點設計－效應面法優(yōu)化豬心血拌丹參最佳炮制工藝，其特征在于：包括以下步驟，

S1、丹參酮 IIA 的測定；

其中，包括以下步驟：

S10、對照品溶液的配置：精密稱取丹參酮 IIA 對照品適量，加甲醇制成質量濃度為190mg/L 的對照品溶液；

S11、供試品溶液的制備：精密稱取生丹參以及丹參炮制品粉末1g，置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇 50ml，稱定重量，超聲波處理30min，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻， 濾過，取續(xù)濾液通過0.45μm 微孔濾膜濾過制得；

S12、標準曲線制備：分別精密吸取標準品溶液 1、2、4、5、6、8、10μl 注入液相色譜儀，在設定的色譜條件下條件測定，分別以質量溶度為橫坐標(X) ，峰面積為縱坐標(Y) ，得丹參酮 IIA 的回歸方程，

S2、丹酚酸 B含量的測定：重復S10-S12步驟，別以質量溶 度為橫坐標(X) ，峰面積為縱坐標( Y) 繪制標準曲線，得到得丹酚酸B的回歸方程；

S3、豬心血拌丹參的制備；

S4、星點設計與效應面分析：

其中，包括以下步驟：

S41、精密稱取 20份S1中制備的豬心血拌丹參樣品每份50g；

S42、選取黃酒用量、豬心血用量、烘干溫度為自變量，每個自變量設計 5 個水平，以丹參酮IIA，丹酚酸B含量的總評“歸一值”為因變量，進行星選實驗，通過Design Expert8.0軟件進行數據處理，得擬合方程；Y =－1.509－0.046A + 0.0417B + 0.0693C + 4.65×10－ 4 AB + 9.51×10－4AC－ 4.46×10－4 BC－1.87×10－4A2－2.64×10－4B2－7.27×10－4 C2 ( r = 0． 90，P = 0.0045)

S5、綜合分析以及用 Design Expert 軟件計算，得到豬心血拌丹參的最佳炮制工藝為32% 黃酒，24% 豬血，烘干溫度 61℃。

2.根據權利要求1所述的一種星點設計－效應面法優(yōu)化豬心血拌丹參最佳炮制工藝，其特征在于：S1步驟中的設定色譜條件為：色譜柱 Diamonsil C18 ( 4． 6mm × 250mm，5μm) ；以乙睛為流動相 A，以 0． 1% 甲酸溶液為流動相 B， 柱 溫 為 30℃ ；檢 測 波 長為 270nm，流 量 體 積 為 1ml/min。

3.根據權利要求1所述的一種星點設計－效應面法優(yōu)化豬心血拌丹參最佳炮制工藝，其特征在于：色譜條件色譜柱 Diamonsil C18 ( 4.6mm× 250mm，5μm) ， 以乙腈 － 0.1%磷酸溶液( 22 : 78) 為流動相；柱溫為 20℃ ； 流速為每分鐘 1ml; 檢測波長為 286nm。

4.根據權利要求1所述的一種星點設計－效應面法優(yōu)化豬心血拌丹參最佳炮制工藝，其特征在于：在步驟S1和S2中還包括以下步驟；

精密度實驗：取同一樣品溶液，在相同的色譜條件下，在 0、6、12、18、是24h 分別進樣10μl，記錄峰面積，測得丹參酮IIA或丹酚酸 B的ＲSD值 ，確定儀器準確度達標，

穩(wěn)定性試驗：取同一樣品溶液，在相同的色譜條件下，在 0、6、12、18、24h 分別進樣 10μl，記錄峰面積，測得丹參酮IIA或丹酚酸 B的ＲSD值，

確保供試品溶液在24h內穩(wěn)定性良好。