[發(fā)明專利]一種口服型重組人乳鐵蛋白絲蛋白水凝膠及其在制備增強免疫力的藥物中的應用

有效

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• 申請日: 2019-11-19
• 公開（公告）號: CN110639007B
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發(fā)明（設計）人: 夏慶友;王峰;許勝;趙萍
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: A61K38/40
• 分類號: A61K38/40;A61K9/06;A61K47/42;A61P37/04
• 代理公司: 重慶航圖知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 50247
• 代理人: 王貴君

本發(fā)明公開了一種口服型重組人乳鐵蛋白絲蛋白(rhLF)水凝膠及其在制備增強免疫力的藥物中的應用，該水凝膠以重組人乳鐵蛋白轉基因家蠶品系的蠶繭為原料，使用尿素溶液提取絲膠蛋白，透析過程中通過氫鍵的誘導自組裝成水凝膠，制得的水凝膠呈現(xiàn)的持續(xù)釋放rhLF特性，能提高小鼠的免疫力且無毒，因此作為增強機體免疫力的藥物。

技術領域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領域，具體涉及一種口服型重組人乳鐵蛋白絲蛋白水凝膠，還涉及水凝膠在制備增強免疫力的藥物中的應用。

背景技術

免疫系統(tǒng)是脊椎動物在體內平衡受到嚴重干擾時的一種高度復雜的防御機制，主要由病原體、損傷、外部污染物和感染引起。免疫反應由先天免疫系統(tǒng)和適應性免疫系統(tǒng)激活和介導。在抵抗疾病方面，免疫反應的調節(jié)起著重要的作用，早在一百多年前免疫系統(tǒng)控制腫瘤細胞的能力就被提出，并且在過去的十多年中得到證實，藥物對免疫調節(jié)和免疫刺激的研究非常重要，且得到了廣大研究者的重視。癌癥是一種極其復雜的疾病，盡管世界各地的研究者對癌癥的治療研究樂此不疲，但仍阻止不了其發(fā)生，根據(jù)統(tǒng)計，2018年新增癌癥病例1700萬例，癌癥相關死亡950萬例，環(huán)磷酰胺是臨床上重要的化療藥物之一，其治療效果在一定程度上歸因于其刺激抗腫瘤免疫反應的能力，但是在抑制腫瘤生長的同時，環(huán)磷酰胺可轉化為4-羥基環(huán)磷酰胺，與DNA結合，誘導免疫細胞凋亡。已有研究表明，高劑量和長時間使用環(huán)磷酰胺可對人體健康和實驗動物產(chǎn)生明顯的毒副作用。為了降低環(huán)磷酰胺產(chǎn)生的毒副作用，更好地發(fā)揮環(huán)磷酰胺的抗腫瘤作用，研究人員進行了多方面的研究，例如利用環(huán)磷酰胺聯(lián)合輔助藥物降低環(huán)磷酰胺的使用劑量；在使用高劑量環(huán)磷酰胺的同時補充CD4陽性T細胞進行特異性腫瘤免疫，從而抑制腫瘤的生長；或者尋找藥物如有天然植物提取物，增強機體自身免疫力，重塑由環(huán)磷酰胺引起的免疫器官萎縮，增強小鼠血清免疫蛋白產(chǎn)生。總的來說，免疫系統(tǒng)是人賴以生存的根本之一，癌癥病人在治療過程中化療藥物發(fā)揮極其重要的作用，然而化療藥物損害免疫系統(tǒng)的副作用不可忽視，緩解高劑量環(huán)磷酰胺帶來的毒副作用一直是研究人員致力的研究熱點。

乳鐵蛋白是一種多功能的天然免疫糖蛋白，研究者已經(jīng)揭示了其在免疫、抗菌、抗腫瘤、抗氧化，刺激細胞增長等方面的生物學活性。乳鐵蛋白在人初乳中含量高達7mg/mL，新生兒在取食乳汁的時候攝入的乳鐵蛋白對于其宿主防御中起著關鍵的作用，主要通過調節(jié)新生兒抗感染的先天和適應性免疫反應，在乳鐵蛋白作用于免疫細胞研究中發(fā)現(xiàn)，乳鐵蛋白可經(jīng)過受體被轉運到細胞內，細胞信號通路例如PI3K/Akt和MAPK/ERK被激活，從而激活細胞周期進程，促進細胞增殖和下游細胞反應。乳鐵蛋白受體在小腸部位高量表達，這預示著小腸是調節(jié)乳鐵蛋白多功能的重要場所。因此，食用的乳鐵蛋白在穿過消化系統(tǒng)過程中保持蛋白結構完整不被降解是乳鐵蛋白受體發(fā)揮作用的必要條件。然而，目前幾乎所有的蛋白質治療都是通過靜脈注射、皮下注射或肌肉注射進行的，不可否認注射是一種可靠的給藥途徑，但是這對于患者來說是痛苦的，尤其是在公共場合給藥，給藥的便捷性降低和給藥技術難度等缺陷均這無疑降低患者給藥的積極性。由于胃腸道消化的復雜性及消化過程中其他因子(例如pH，酶，離子強度)的存在，藥物往往容易被降解，口服蛋白藥物的療效及發(fā)展因此受到限制。藥物傳遞系統(tǒng)的研發(fā)使口服蛋白藥物成為了可能。在過去數(shù)十年的研究中，研究人員開發(fā)多種傳遞系統(tǒng)包括水凝膠系統(tǒng)、納米顆粒、脂質體和膠束等，旨在促進藥物滲透，降低蛋白水解率，延長蛋白在腸胃停留時間，從而提高口服蛋白的生物利用率。然而，在這些傳遞系統(tǒng)中存在藥物突發(fā)性釋放，低載藥量，加工復雜或者在加工過程中活性物質失活等缺陷限制了他們在臨床應用的發(fā)展。因此，發(fā)展一種簡易且高效的藥物傳遞系統(tǒng)提高乳鐵蛋白的治療效率是有必要的。水凝膠是三維網(wǎng)狀交聯(lián)的水溶性聚合物，通常具有高含水量(可以高達99.9％)和良好的生物相容性。水凝膠在臨床實踐和實驗醫(yī)學中被廣泛應用，如細胞治療，傷口敷料，生物粘附，組織工程和再生醫(yī)學等。水凝膠獨特的理化性質引起了研究人員對于其用作藥物載體的興趣。絲膠是家蠶絲主要的成分之一，具有良好的親水性、生物相容性和降解性，是一種非常有用的生物材料，例如絲膠增強細菌纖維素作為組織工程支架用于腸道修復，絲膠和聚乙烯醇組成的水凝膠承載納米銀可以有效抑制細菌和真菌的生長，軟瓊脂絲膠水凝膠能夠促進慢性傷口的愈合，可注射絲膠水凝膠課作為體內缺血心肌修復的生物材料，絲膠/左旋糖酐制備的可注射水凝膠承載阿霉素可以顯著抑制小鼠黑色素瘤的生長。有意思的是，絲膠的高分子特性(超過300KDa)可以使其在不添加交聯(lián)劑的情況下自組裝成水凝膠，研究表明以純絲膠生物材料裝載FGF1的水凝膠體外可以顯著促進細胞的增殖。