[發明專利]患者來源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型的構建方法及其應用

在審

• 申請號: 201911115125.8
• 申請日: 2019-11-14
• 公開（公告）號: CN110959579A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 顧雋
• 申請（專利權）人: 顧雋
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;A61K49/00
• 代理公司: 北京連和連知識產權代理有限公司 11278
• 代理人: 田方正

本發明屬于醫藥領域，本發明成功將患者來源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型技術引入淋巴瘤藥物研發和相關藥物體內藥敏試驗中。構建的患者來源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型，與腫瘤體外藥敏試驗和傳統小鼠移植瘤模型相比，該模型可以更好的研究和進一步闡述腫瘤的發生、發展機制，同時為抗癌藥物研發提供了較以往更有價值的新的動物模型。本發明應用于小鼠模型構建領域。

技術領域

本發明涉及一種患者來源的淋巴瘤免疫缺陷小鼠移植瘤模型的構建方法及其應用，用于解決目前淋巴瘤體外藥敏實驗與臨床療效的符合率低的問題。

背景技術

腫瘤是一種嚴重威脅人類健康的多發病和常見病，其發病機制尚未完全闡明。淋巴瘤是一種惡性腫瘤，可分為霍奇金淋巴瘤（Hodgkin’s Lymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin’s Lymphoma, NHL）兩大類。NHL最多見，約占到85%左右。近年來，NHL的發病率呈逐年上升趨勢，發病率位居男性惡性腫瘤的第6位，女性惡性腫瘤的第7位，在0-14歲人群中，發病率高居第3位，嚴重威脅人類健康。

對于不同類型淋巴瘤患者而言，往往采用的治療策略和治療效果是有差異的。換句話說，同一套治療方案對不同類型淋巴瘤患者可能會有不同效果。例如在DLBCL中，5年生存率均達到70%以上。在高度侵襲性亞型伯基特淋巴瘤（Burkitt）中，患者初始治療有效率可達48%-83%，而部分患者初始治療不能獲得緩解，或者緩解后復發，而且患者對傳統的挽救治療的緩解率僅為38%，預后仍然較差。對于T/NK細胞性淋巴瘤，由于缺乏有效的靶向藥物，與B細胞性淋巴瘤相比，預后更差。

基于上述事實，如何確定淋巴瘤患者腫瘤類型具有重要意義。目前腫瘤體外藥敏試驗是最簡單、易行的一種檢測方法，抗腫瘤藥物體外作用于腫瘤細胞一定時間后，通過檢測活細胞的比例來評判抗腫瘤藥物敏感性。但體外藥敏實驗不足之處在于腫瘤細胞體外培養，忽略了腫瘤微環境對腫瘤生存的影響，也忽略了腫瘤藥物體內藥代動力學影響，體外藥敏實驗與臨床療效的符合率只有50%-70%，因此，探索更加敏感、可靠的腫瘤藥敏檢測方法，對于合理制定腫瘤的個體化治療方案，提高療效和預后具有非要重要的實際應用價值。

腫瘤體內藥敏試驗可以模擬體內微環境，并且考慮了藥代動力學對藥效影響，彌補了體外藥敏試驗的不足。

傳統的小鼠移植瘤模型是把腫瘤細胞株接種到免疫缺陷小鼠皮下，長成移植瘤，然后給小鼠各種藥物處理，用來篩選腫瘤對新藥的敏感性以及藥物聯合對腫瘤的作用。但腫瘤接種至皮下，不能完全模擬體內微環境，造成經過該方法篩選有效的藥物，臨床試驗中無效。因此，它不能指導臨床用藥，僅限于篩查新藥。

腫瘤組織來源小鼠移植瘤模型（Patient-derived xenograft, PDX）技術直接將患者的腫瘤組織接種至免疫缺陷小鼠皮下，長成移植瘤。通過這種方法建立的移植瘤模型，容易形成移植瘤并不斷傳代，還保持了腫瘤細胞的多樣性，另外由于腫瘤組織中有腫瘤自身間質細胞和血管，能夠模擬體內微環境等優點。在實體瘤中，Fiebig等的研究顯示，基于該模型的抗癌耐藥性預測的準確率達97%，敏感性預測準確率達92%。腫瘤組織來源的小鼠移植瘤模型雖然能夠用于檢測腫瘤藥物敏感性，但大部分都是基于實體瘤的研究，在淋巴瘤中還沒有報道，具有一定的創新性。因此，本發明建立復發/難治淋巴瘤組織小鼠移植瘤模型，用于靶向新藥臨床藥敏試驗的檢測，指導臨床用藥。

本發明可以用于靶向藥物敏感性檢測，篩選出敏感靶向藥物，指導患者個體化用藥，最終達到提高療效，改善預后，解決臨床問題。另外，還有利于收集并通過移植瘤傳代體外保存淋巴瘤組織，研究淋巴瘤耐藥機制，篩選逆轉耐藥的新的藥物。

發明內容