[發明專利]一種膠原凝膠支架及其在提高自體脂肪細胞移植存活率中的應用

在審

• 申請號: 201911105798.5
• 申請日: 2019-11-13
• 公開（公告）號: CN110841115A
• 公開（公告）日: 2020-02-28
• 發明（設計）人: 戴建武;金曉峰;肖志峰;趙燕南
• 申請（專利權）人: 中國科學院遺傳與發育生物學研究所
• 主分類號: A61L27/52
• 分類號: A61L27/52;A61L27/56;A61L27/58;A61L27/24
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 閆書寧

本發明公開了一種膠原凝膠支架及其在提高自體脂肪細胞移植存活率中的應用。將10例未經手術治療的嚴重聲門損傷或聲門功能不全患者隨機分為對照組和膠原支架組，然后將植入物(膠原支架組的植入物為2mL膠原凝膠支架和10⁵?10⁶個脂肪細胞，對照組的植入物為10⁵?10⁶個脂肪細胞)經口注射至粘膜下組織和甲狀腺杓狀肌中，同側杓狀軟骨的聲帶側突單點注射。結果表明，所有患者注射的脂肪細胞均有不同程度的吸收和擴散，但膠原支架組的患者在任何情況下都沒有觀察到完全吸收。由此可見，與僅注射脂肪細胞相比，在患者體內注射膠原凝膠支架和脂肪細胞，脂肪細胞的存活時間的顯著延長。本發明具有重要的應用價值。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，具體涉及一種膠原凝膠支架及其在提高自體脂肪細胞移植存活率中的應用。

背景技術

喉癌手術或單側聲帶麻痹可導致嚴重的聲門閉合不良進而導致永久性失音，這是聲帶治療中最具挑戰性的臨床問題之一。聲門閉合不良是由發音時聲帶閉合不足引起的。聲門功能不全越嚴重，患者的癥狀強度越大。研究表明，聲門功能不全患者的語音質量不理想，會顯著降低患者的生活質量。通過腔內注射自體脂肪可以再生部分聲帶結構或改善聲帶麻痹。但是，由于細胞易擴散、存活率低和脂肪可能被再吸收等原因，自體脂肪移植的長期預后可能會逐漸變差，存在較大的不確定性。以患者年齡段進行分組，患者聲帶內注射自體脂肪1年后平均失敗率接近20％(在1％-42％之間)。因此，創造一個良好的環境限制和改善脂肪細胞的移植是至關重要的。

發明內容

本發明的目的是提高脂肪細胞移植的存活率。

本發明首先保護一種膠原凝膠支架的制備方法，可依次包括如下步驟：

(1)取牛肌腱組織，丙酮浸泡處理5-15h(如5-10h、10-15h、5h、10h或15h)；

(2)NaOH處理10-30min(如10-20min、20-30min、10min、20min或30min)；

(3)去除水分；

(4)先用醋酸浸泡36-60h(如36-48h、48-60h、36h、48h或60h)；再攪拌12-24h(如12-18h、18-24h、12h、18h或24h)；

(5)透析，收集沉淀；

(6)去除水分；

(7)用緩沖液溶解，獲得膠原凝膠支架。

完成步驟(1)后、進行步驟(2)之前，還包括步驟(A)；所述步驟(A)為：充分清洗(如用水充分清洗)。

完成步驟(2)后、進行步驟(3)之前，還包括步驟(A)；所述步驟(A)為：充分清洗(如用水充分清洗)。

上述任一所述充分清洗具體可為去離子水清洗10-20次，每次清洗20min。

所述步驟(1)中，牛肌腱組織的制備方法可為：取牛腱子肉，徹底刮除脂肪組織和肌肉組織，充分清洗(如用水充分清洗)，獲得牛肌腱組織。

所述步驟(1)中“丙酮浸泡處理5-15h”，期間每隔0.5h以上(如0.5h、1h、2h)更換一次丙酮。

所述步驟(2)中，NaOH處理的濃度可為1-4M(如1-2M、2-4M、1M、2M或4M)。

所述步驟(2)中，NaOH具體可為NaOH溶液。NaOH溶液具體可為NaOH水溶液。

所述步驟(3)和所述步驟(6)中，去除水分通過15-25℃(如15-20℃、20-25℃、15℃、20℃或25℃)、真空凍干36-60h(如36-48h、48-60h、36h、48h或60h)實現。