[發(fā)明專利]一種測(cè)定飼料中尼卡巴嗪含量的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911105176.2
• 申請(qǐng)日: 2019-11-13
• 公開（公告）號(hào): CN110672754A
• 公開（公告）日: 2020-01-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫播東;章厲劼;錢莘莘;羅永成;周藝林;郭萍;周澤曉;廖歡;楊強(qiáng);趙貴;焦仁剛;古海;王培峰;謝麗麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貴州省獸藥飼料監(jiān)察所(貴州省獸藥殘留監(jiān)測(cè)中心)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 52100 貴陽中新專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 張行超

本發(fā)明公開了一種測(cè)定飼料中尼卡巴嗪含量的方法，包括：(1)稱取待測(cè)飼料樣品，加二甲基甲酰胺振搖提取，過濾得供試樣品溶液；(2)將所述供試樣品溶液上液相色譜儀進(jìn)行分析，測(cè)定尼卡巴嗪的峰面積；(3)利用多組已知質(zhì)量濃度的尼卡巴嗪溶液測(cè)定尼卡巴嗪峰面積，以尼卡巴嗪質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，建立尼卡巴嗪線性回歸方程；根據(jù)前述待測(cè)飼料樣品的尼卡巴嗪峰面積，利用尼卡巴嗪線性回歸方程計(jì)算待測(cè)飼料中尼卡巴嗪的質(zhì)量濃度，再計(jì)算待測(cè)飼料中尼卡巴嗪的含量。本發(fā)明參照原檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，優(yōu)化了檢驗(yàn)步驟，提高了檢驗(yàn)效率，回收率與重復(fù)性均能達(dá)到要求。

技術(shù)領(lǐng)域

一種測(cè)定飼料中尼卡巴嗪含量的方法，屬于尼卡巴嗪檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

尼卡巴嗪為二硝基均二苯脲和羥基二甲基嘧啶復(fù)合物。為黃色或黃綠色粉末；無臭，稍具異味。微溶于二甲基甲酰胺中，在水、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、乙醚中不溶。尼卡巴嗪的兩種成分能分別由家禽消化道吸收，并廣泛分布于組織及體液中，用于預(yù)防雞球蟲病。《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》對(duì)不同種類尼卡巴嗪預(yù)混劑的使用有不同的規(guī)定，其中規(guī)定每1kg飼料中，尼卡巴嗪含量范圍為20-125mg。由于尼卡巴嗪能使產(chǎn)蛋率、受精率以及蛋品質(zhì)量下降和棕色蛋殼色澤變淺，故產(chǎn)蛋雞禁用。此外高溫季節(jié)禁用。

目前我國對(duì)飼料中尼卡巴嗪含量的檢測(cè)有國家標(biāo)準(zhǔn)：《GB/T 19423-2003飼料中尼卡巴嗪的測(cè)定-高效液相色譜法》，但該標(biāo)準(zhǔn)中：過柱步驟繁瑣，操作復(fù)雜，回收率、重復(fù)性低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是：提供一種靈敏度高、準(zhǔn)確性好、分析速度快的測(cè)定飼料中尼卡巴嗪含量的方法，通過合理的優(yōu)化條件，以解決現(xiàn)有技術(shù)存在的過柱步驟繁瑣，操作復(fù)雜，回收率、重復(fù)性低等問題。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種測(cè)定飼料中尼卡巴嗪含量的方法，包括：

(1)預(yù)處理

稱取待測(cè)飼料樣品，加二甲基甲酰胺振搖提取；

過濾得供試樣品溶液；

(2)液相色譜儀分析

將所述供試樣品溶液上液相色譜儀進(jìn)行分析，測(cè)定尼卡巴嗪的峰面積；

(3)計(jì)算飼料中尼卡巴嗪的含量

利用多組已知質(zhì)量濃度的尼卡巴嗪溶液測(cè)定尼卡巴嗪峰面積，以尼卡巴嗪質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，建立尼卡巴嗪線性回歸方程；

根據(jù)前述待測(cè)樣品上機(jī)液的尼卡巴嗪峰面積，利用尼卡巴嗪線性回歸方程計(jì)算待測(cè)樣品上機(jī)液中尼卡巴嗪的質(zhì)量濃度，再計(jì)算待測(cè)飼料中尼卡巴嗪的含量。

優(yōu)選的，所述尼卡巴嗪線性回歸方程為：

y＝0.5783x-0.0432

式中：y為尼卡巴嗪峰面積，x為待測(cè)樣品上機(jī)液中尼卡巴嗪的質(zhì)量濃度。

優(yōu)選的，飼料中尼卡巴嗪含量的計(jì)算公式為：

式中：C為試樣中尼卡巴嗪含量，單位為mg/kg；

x為待測(cè)樣品上機(jī)液中尼卡巴嗪的質(zhì)量濃度，單位為μg/mL；

m為飼料樣品稱樣質(zhì)量，單位為g；

f為飼料樣品稀釋倍數(shù)。

優(yōu)選的，飼料中尼卡巴嗪含量的檢測(cè)范圍為≥3mg/kg，定量范圍為≥10mg/kg。