[發明專利]一種S100蛋白的檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201911099667.0
• 申請日: 2019-11-12
• 公開（公告）號: CN110672849B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 劉雅奇;史小芹;渠文濤;周金龍;萬鵬;付光宇;吳學煒
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/543
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

本發明涉及醫學檢驗技術領域，特別涉及一種S100蛋白的檢測試劑盒。該S100蛋白的檢測試劑盒包括包被有S100抗體的磁微粒混懸液、樣品稀釋液、酶結合物、校準品和質控品；樣品稀釋液為含有螯合劑、防腐劑、蛋白質類穩定劑、分散劑、表面活性劑、阻斷劑的Bis?Tris緩沖液；螯合劑為EGTA，阻斷劑為腫瘤清潔抗體1、腫瘤清潔抗體2、腫瘤清潔抗體3或腫瘤清潔抗體4中的一種或兩種以上混合物。該S100蛋白的檢測試劑盒具有較寬的線性范圍，靈敏度和特異性高，實現S100蛋白的快速、自動化檢測。

技術領域

本發明涉及醫學檢驗技術領域，特別涉及一種S100蛋白的檢測試劑盒。

背景技術

惡性黑色素瘤(黑色素瘤)是臨床上較為常見的皮膚粘膜和色素膜惡性腫瘤，也是發病率增長最快的惡性腫瘤之一，年增長率為3％～5％。2018年全球黑色素瘤新發病例287723例(占比1.6％)，死亡例數為60712例(占比0.6％)。據統計，2015年我國黑色素瘤新發病例8000例(占比0.2％)，死亡例數為3200例(占比0.1％)。黑色素瘤在我國雖然是少見惡性腫瘤，但病死率高，發病率也在逐年增加，因此，黑色素瘤已經成為嚴重危及我國人民健康的疾病之一。

我國黑色素瘤與歐美白種人差異較大，兩者在發病機制、生物學行為、組織學形態、治療方法以及預后等方面差異較大。在亞洲人和其他有色人種中，原發于肢端的黑色素瘤約占50％，常見的原發部位多見于足底、足趾、手指末端及甲下等肢端部位，原發于黏膜，如直腸、肛門、外陰、眼、口鼻咽部位的黑色素瘤約占20％～30％；而對于白種人來說，原發于皮膚的黑色素瘤約占90％，原發部位常見于背部、胸腹部和下肢皮膚；原發于黏膜的黑色素瘤只占1％～5％。

近些年在尋找惡性黑色素瘤的生物標志物方面已經做了大量工作，檢測了多種生物分子，如黑色素瘤相關抗原、細胞因子、金屬蛋白酶、血管形成因子、黏附分子、細胞生長因子、免疫調節分子和黑色素合成中的代謝物。在所有這些分子中，S100β是目前在惡性黑色素瘤中應用最廣泛的生物標志分子，特別是在轉移性黑色素瘤，S100β水平的升高與預后相關。升高的血清S100β水平強烈提示預后不良。S100β在惡性黑色素瘤的臨床分期方面也具有預測價值。惟一不足的是，血清S100β水平的升高并不是惡性黑色素瘤所特有的，還見于肝、腎損傷，以及各種炎癥和感染性疾病。

S100是由Moore從牛腦中分離到的一種神經系統特有的組分，由于這種組分在中性條件下可以很好地溶解于100％飽和硫酸銨中，因此命名為S100。S100含有兩個多肽S100A1和S100β，它們的分子量接近于10KD，且含有兩個結合Ca²⁺的EF-hand結構域。自從這兩種S100蛋白被發現和定性以來，根據氨基酸序列和蛋白結構的相似性，已有20種該家族成員被發現，它們氨基酸序列的同源性達到25％～60％。絕大多數S100蛋白無論在Ca²⁺結合或非結合的狀態下都以非共價鍵形成同源或異源二聚體，S100蛋白表達有組織和細胞特異性，這就決定了S100蛋白功能的多樣性。血清S100β對各期惡性黑色素瘤患者都具有重要的臨床意義。據報道，S100β在Ⅰ期和Ⅱ期(原發和局部)皮膚惡性黑色素瘤的診斷敏感性分別為15％或者更低，遠低于Ⅳ期惡性黑色素瘤的60％～85％的敏感性。對局部淋巴結轉移(Ⅲ期)，敏感性從10％～50％不等。最近一項研究采用了更低的S100β閾值(0.12μg/L)，發現S100β的敏感性在Ⅱ期大約為30％，在Ⅲ期患者為50％。逆轉錄-聚合酶鏈反應檢測Ⅲ和Ⅳ期惡性黑色素瘤患者的多種生物標志物[酪氨酸酶、Melan-A(又名被T細胞識別的黑色素瘤抗原，MART-1)、黑色素瘤抗原3、糖蛋白100和p97]和S100β，結果顯示S100β在發現轉移方面具有最高的敏感性，并且這些生物標志的逆轉錄-聚合酶鏈反應結果和S100β的區別非常顯著，在Ⅲ期疾病分別為18.2％和45.5％，Ⅳ期分別為45％和80％。

已有研究表明，血清中的S100還可以作為神經系統損傷的指標。各種腦補病變后，腦脊中S100水平升高并釋放到外周血中。在一些事件造成的腦損傷中，如創傷性腦損傷或中風，可以檢出S100。