[發明專利]一種組織培養快速繁殖木薯種苗的方法有效
| 申請號: | 201911099434.0 | 申請日: | 2019-11-12 |
| 公開(公告)號: | CN110637725B | 公開(公告)日: | 2022-11-08 |
| 發明(設計)人: | 杜尚廣;余波 | 申請(專利權)人: | 江西師范大學;南昌大學;南昌師范學院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 南昌大牛知識產權代理事務所(普通合伙) 36135 | 代理人: | 陳秋平 |
| 地址: | 330000 *** | 國省代碼: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 組織培養 快速 繁殖 木薯 種苗 方法 | ||
1.一種組織培養快速繁殖木薯種苗的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)外植體選擇:選擇健壯無病害、生長旺盛的植株,剪取距莖頂端10厘米幼嫩莖段,從葉柄基部切除葉片,剪取帶有腋芽的莖段,即為外植體;
(2)外植體消毒:將步驟(1)中的外植體用自來水沖洗10分鐘,清除塵土和碎屑,再完全浸沒于飽和洗衣粉溶液10分鐘,流水沖洗30-60分鐘,將洗好的莖段放入廣口瓶,在無菌工作臺上采用兩步法脫毒,75%酒精消毒20秒,無菌水沖洗2-3次,用0.1%升汞消毒6分鐘,無菌水沖洗3-4次,置于無菌濾紙上吸干表面水分,最后將外植體剪成1厘米莖段;
(3)叢生芽誘導培養:將步驟(2)中的外植體接種到叢生芽誘導培養基中,培養14天后獲得木薯叢生芽,再切取再生芽莖段0.5-1厘米接種到叢生芽誘導培養基中,進行誘導分化、增殖培養,即誘導過程同步增殖;當擴繁系數達到10倍時,進行生根培養,控制溫度25±2℃,光周期12h/d,光照強度6000lx;叢生芽誘導培養基是以MS培養基為基本培養基,添加20g·L-1蔗糖,7g·L-1瓊脂,0.5mg·L-1 6-芐基氨基嘌呤,2μmol·L-1 硫酸銅,pH5.8~6.0;
(4)生根培養:將步驟(3)中獲得的不定芽接種到生根培養基中,培養30天后,即可獲得大量木薯試管苗,溫度23-27℃,光周期12h/d,光照強度6000lx;生根培養基是以MS培養基為基本培養基,添加30g·L-1蔗糖,7g·L-1瓊脂,0.1mg·L-1萘乙酸,0.6mg·L-1 6-芐基氨基嘌呤,2.5μmol·L-1 硫酸銅,pH5.8~6.0;
(5)幼苗馴化:取出試管苗,用自來水洗凈根部殘留的培養基,再用0 .1%KMnO4浸泡30秒,最后用自來水清洗,將處理好的試管苗移栽至營養缽基質中馴化,將成活的幼苗移栽到大田中,即為木薯種苗。
2.根據權利要求1所述的一種組織培養快速繁殖木薯種苗的方法,其特征在于,步驟(1)所述述木薯品種為華南205。
3.根據權利要求1所述的一種組織培養快速繁殖木薯種苗的方法,其特征在于,步驟(2)所述1厘米莖段上至少含有一個葉片。
4.根據權利要求1所述的一種組織培養快速繁殖木薯種苗的方法,其特征在于,所述營養缽基質為土壤和珍珠巖,體積比是1:3;馴化14天,將成活的幼苗移栽到大田中,即為木薯種苗。
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