[發明專利]一種CXCR4修飾的蛇床子素長循環脂質體、制備方法以及其應用

在審

• 申請號: 201911098913.0
• 申請日: 2019-11-12
• 公開（公告）號: CN110638760A
• 公開（公告）日: 2020-01-03
• 發明（設計）人: 楊靜嫻;倪穎男;孔亮;肖洪賀;吳雨桐
• 申請（專利權）人: 遼寧中醫藥大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/42;A61K31/37;A61P25/28
• 代理公司: 21107 沈陽亞泰專利商標代理有限公司
• 代理人: 史力伏

1.一種CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體，其特征在于，所述的CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體以基質細胞衍生因子受體4基因重組蛋白為靶向載體。

2.一種CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體，其特征在于，所述的CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體的制備原料按重量計由CXCR4重組蛋白1.5-2.5mg、DSPE-PEG2000 3-4mg、DSPE-PEG2000-MAL 1-2mg、磷脂22-25mg、膽固醇4-5mg、蛇床子素1-1.4mg組成。

3. 如權利要求2所述的CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體，其特征在于，所述的CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體的制備原料按重量計由CXCR4重組蛋白2mg、DSPE-PEG₂₀₀₀ 3.5mg、DSPE-PEG₂₀₀₀-MAL 1.5mg、磷脂25mg、膽固醇5mg、蛇床子素1.4mg組成。

4.一種CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體的制備方法，具體包括下述步驟：

步驟一、精密稱取CXCR4重組蛋白溶解于pH=8的磷酸緩沖液中，制成5 mg/mL的CXCR4蛋白溶液；精密稱取DSPE-PEG₂₀₀₀-MAL溶解于pH=6.5磷酸緩沖液中，制成3.6 mg/mL的磷脂溶液；將CXCR4重組蛋白與Traut’s試劑按摩爾比1：10比例進行反應1 h，將反應后的溶液置于截留分子量3 Kd的透析袋中除去Traut’s試劑，將硫醇化的CXCR4蛋白與DSPE-PEG₂₀₀₀-MAL按摩爾比1：10比例進行反應得到CXCR4-DSPE-PEG₂₀₀₀；

步驟二、采用薄膜分散法制備Ost-Lips：按摩爾比100:40:3.8:17.3的比例精密稱量磷脂、膽固醇、DSPE-PEG₂₀₀₀與Ost放在同一個圓底燒瓶中，加入5 mL甲醇，40 kHz超聲溶解5min，用旋轉蒸發器40 ℃減壓去除溶劑，圓底燒瓶底部形成一層均勻的脂質膜，加入5 mLpH為8.2的Tris堿緩沖液水化脂質膜，并于超聲粉碎機中300 W超聲10 min使脂質膜完全溶解，然后將得到的脂質膜水化液于超聲波細胞粉碎機200 w繼續破乳10 min，然后將脂質體溶液通過0.22 μm聚碳酸酯膜擠壓3次，即得Ost-Lips；

步驟三、將步驟二制得的Ost-Lips與步驟一制得的CXCR4-DSPE-PEG₂₀₀₀以摩爾比658：1的比例室溫孵育2 h，即得CXCR4-Ost-Lips。

5.一種CXCR4修飾蛇床子素長循環脂質體在制備治療阿爾茨海默病藥物中的應用。