[發明專利]一種微生物藥敏快速檢測方法在審
| 申請號： | 201911094186.0 | 申請日： | 2019-11-11 |
| 公開（公告）號： | CN110669820A | 公開（公告）日： | 2020-01-10 |
| 發明（設計）人： | 鄭業煥;伊首璞;李軼;張瑞峰;付光宇;吳學煒 | 申請（專利權）人： | 鄭州安圖生物工程股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/18 | 分類號： | C12Q1/18;G01N27/62 |
| 代理公司： | 11227 北京集佳知識產權代理有限公司 | 代理人： | 潘穎 |
| 地址： | 450000 河南省*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 抗生素 微生物 穩定性同位素 微生物質 培養基孵育 多次分離 合理用藥 快速檢測 濃度梯度 人力物力 時間縮短 洗滌步驟 藥敏檢測 質譜檢測 相似度 檢測 氮源 孵育 抑菌 對抗 | ||
1.一種微生物藥敏快速檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
設置抗生素處理組和不含抗生素的對照組，抗生素處理組采用標記有穩定性同位素、含有一系列濃度梯度的抗生素的培養基孵育待測微生物；不含抗生素的對照組采用標記有穩定性同位素的培養基孵育待測微生物；所述穩定性同位素為15N的氮源和/或13C的碳源；
取孵育后的微生物進行質譜檢測，比較抗生素處理組的微生物質譜圖與對照組的微生物質譜圖的相似度，得到該抗生素對待測微生物的最低抑菌濃度。
2.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述碳源為葡萄糖、乙酸鈉或蔗糖中的一種或幾種。
3.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述標記有13C的碳源占總碳源的質量百分含量為30％～100％。
4.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述氮源為無機氮源和/或有機氮源，所述無機氮源為氯化銨、硫酸銨、硝酸鉀、硝酸銨中的一種或幾種，所述有機氮源為尿素和/或氨基酸。
5.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述標記有15N的氮源占總氮源的質量百分含量為30％～100％。
6.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述抗生素的濃度范圍為0mg/mL～10mg/mL。
7.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述抗生素的濃度梯度為1～10倍。
8.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述待測微生物在培養基中的濃度為(1.0～6.0)×108/mL。
9.根據權利要求1所述的快速檢測方法，其特征在于，所述孵育的時間為20分鐘～1小時。
10.根據權利要求1至9中任一項所述的快速檢測方法，其特征在于，所述最低抑菌濃度為相似度低于50％～70％所對應的抗生素處理組中最低的抗生素濃度。
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