[發(fā)明專利]一種通過基因編輯技術(shù)從番茄背景材料中創(chuàng)制多種果色材料的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201911093312.0 | 申請(qǐng)日： | 2019-11-11 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN112779282A | 公開（公告）日： | 2021-05-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李傳友;張瀟斐;楊天霞;鄧?yán)?/a>;蔣紅玲;周明;李常保;陳謙 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所;北京市農(nóng)林科學(xué)院;山東農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N15/82 | 分類號(hào)： | C12N15/82;A01H5/08;A01H1/02;A01H6/82;C12N15/11;C12N15/113;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 白艷 |
| 地址： | 100101 北*** | 國(guó)省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 通過 基因 編輯 技術(shù) 番茄 背景 材料 創(chuàng)制 多種 方法 | ||
1.一種番茄多果色材料的制備方法，為如下方法1)或2)：
1)所示的方法包括如下步驟：降低受體番茄材料基因組中的果實(shí)顏色調(diào)控蛋白PSY1、MYB12和SGR1中至少一種的活性或含量，得到目的番茄多果色材料；
2)所示的方法包括如下步驟：對(duì)所述受體番茄材料基因組中的果實(shí)顏色調(diào)控基因PSY1、MYB12和SGR1中至少一種進(jìn)行基因編輯，得到目的番茄多果色材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：
所述降低受體番茄材料基因組中的果實(shí)顏色調(diào)控蛋白PSY1、MYB12和SGR1中至少一種的含量，或，所述對(duì)所述受體番茄材料基因組中的果實(shí)顏色調(diào)控基因PSY1、MYB12和SGR1中至少一種進(jìn)行基因編輯，均通過CRISPR/Cas9系統(tǒng)對(duì)所述受體番茄材料基因組中的果實(shí)顏色調(diào)控基因PSY1、MYB12和SGR1中至少一種進(jìn)行基因編輯。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：
所述蛋白PSY1為序列1所示的PSY1基因編碼的蛋白；
所述蛋白MYB12為序列2所示的MYB12基因編碼的蛋白；
所述蛋白SGR1為序列3所示的SGR1基因編碼的蛋白；
或，所述基因PSY1的核苷酸序列為序列1；
或，所述基因MYB12的核苷酸序列為序列2；
或，所述基因SGR1的核苷酸序列為序列3。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于：
所述CRISPR/Cas9系統(tǒng)中，PSY1基因編輯的sgRNAP1、PSY1基因編輯的sgRNAP2、MYB12基因編輯的sgRNAM1、MYB12基因編輯的sgRNAM2、SGR1基因編輯的sgRNAS1和SGR1基因編輯的sgRNAS2；
所述sgRNAP1的靶序列為序列6所示的DNA分子；
所述sgRNAP2的靶序列為序列7所示的DNA分子；
所述sgRNAM1的靶序列為序列8所示的DNA分子；
所述sgRNAM2的靶序列為序列9所示的DNA分子；
所述sgRNAS1的靶序列為序列4所示的DNA分子；
所述sgRNAS2的靶序列為序列5所示的DNA分子。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的方法，其特征在于：
所述CRISPR/Cas9系統(tǒng)包括含有sgRNAP1編碼基因、sgRNAP2編碼基因、sgRNAM1編碼基因、sgRNAM2編碼基因、sgRNAS1編碼基因、sgRNAS2編碼基因和cas9基因的重組載體；
所述sgRNAS1編碼基因?yàn)樾蛄?0第5237-5312位所示的DNA分子；
所述sgRNAS2編碼基因?yàn)樾蛄?0第5410-5485位所示的DNA分子；
所述sgRNAP1編碼基因?yàn)樾蛄?0第5583-5658位所示的DNA分子；
所述sgRNAP2編碼基因?yàn)樾蛄?0第5754-5829位所示的DNA分子；
所述sgRNAM1編碼基因?yàn)樾蛄?0第5926-6001位所示的DNA分子；
所述sgRNAM2編碼基因?yàn)樾蛄?0第6099-6174位所示的DNA分子；
或，所述Cas9蛋白的編碼基因?yàn)樾蛄?0第7282-11553所示的DNA分子。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述編輯為向所述受體番茄材料中導(dǎo)入所述重組載體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一所述的方法，其特征在于：
每種所述方法中，在向所述受體番茄材料中導(dǎo)入所述重組載體后還包括如下步驟：選取PSY1、MYB12、SGR1三個(gè)基因至少一個(gè)突變的植株，為目的番茄多果色材料；
所述突變?yōu)殡s合突變或純合突變。
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