[發明專利]一種多肽合成方法

有效

• 申請號: 201911090489.5
• 申請日: 2019-11-08
• 公開（公告）號: CN110776552B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發明（設計）人: 沈紅超;孔偉偉;蘇生鵬
• 申請（專利權）人: 廣州市雅彩盛生物科技有限公司
• 主分類號: C07K1/04
• 分類號: C07K1/04;C07K1/06;F17D1/00;F17D3/01
• 代理公司: 佛山市順德區榮粵專利代理事務所(普通合伙) 44359
• 代理人: 白永才

本發明屬于多肽合成技術領域，具體的說是一種多肽合成方法，該合成方法中所使用到的合成設備包括支架和合成罐；支架上端中心位置設有正反轉電機，正反轉電機的輸出軸連接合成罐內設有的轉動軸一端，轉動軸另一端連接多個攪動板；合成罐外壁與合成罐內壁之間開設有加溫腔；合成罐內壁設有一號板，一號板上開設多個出氣孔，且出氣孔通過一號板與一號板下端面設有的一號管道連通，且控制單元用于控制氮氣通入一號管道和合成罐內廢液從一號管道流出，控制單元左端設有廢液流出的二號管道，控制單元右端設有氮氣通入的三號管道；通過正反轉電機、合成罐、一號管道、控制單元、二號管道和三號管道，實現合成罐內多肽的合成。

技術領域

本發明屬于多肽合成技術領域，具體的說是一種多肽合成方法。

背景技術

多肽是α－氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物，是蛋白質水解的中間產物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽，同理類推還有三肽、四肽、五肽等。通常由10-100個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽。

多肽合成是一個固相合成順序一般從N端(氨基端)向C端(羧基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發展成功了固相多肽合成方法以來，經過不斷的改進和完善，到今天固相法已成為多肽和蛋白質合成中的一個常用技術，表現出了經典液相合成法無法比擬的優點，從而大大的減輕了每步產品提純的難度。多肽合成總的來說分成兩種：固相合成和液相多肽合成。

多肽合成儀采用溫和反應法合成多肽，一般可分為單純氮氣鼓泡和搖動式兩種。單純氮氣鼓泡法采用氮氣鼓泡的反應方式來對反應物進行攪拌，即合成儀上反應器是固定的，氮氣從反應器的下方通過反應器到上部排出，在這一過程中產生的汽泡把固相和液相混合起來。

多肽合成設備由于氮氣從反應器的下方往上排出，鼓動反應，當合成過程停止時，氮氣供應關閉，容易使廢液造成逆流，進入氮氣供應管道，造成污染；同時多肽在合成，會產生多肽固相，且多肽固相具有粘附性，會粘附在合成設備上，導致多肽合成不成功。

發明內容

針對現有技術的不足，以解決多肽合成設備中廢液逆流，進入氮氣管道，造成污染，以及多肽固相粘附在多肽合成設備上的的問題，本發明提供了一種多肽合成方法。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：本發明所述的一種多肽合成方法，其合成方法包括以下步驟：

S1：首先將苜蓿烘干，然后破壁粉碎，保持苜蓿粉碎顆粒度在120-150目之間，接著使用微孔濾袋進行過濾，同時加入纖維素酶，并使用超聲萃取設備，對包含有微孔濾袋本體的粉碎物進行連續萃取；

S2：將S1中超聲萃取產物轉入發酵設備中，向發酵設備內添加蛋白水解酶，并控制發酵溫度保持在50-70℃之間，分解時間控制在3-4個小時內；

S3：待分解結束后，將分解發酵的反應也轉移到離心設備中，使用分層生物膜對離心分離設備內的分解液進行分層分離，得到氨基酸產物；

S4：將S3中的氨基酸產物投放入合成裝置中，再配以入多肽樹脂，Fmoc保護的氨基酸、縮合劑和溶劑進行反應，同時通入氮氣，消除合成設備上的靜電，待反應結束后，過濾掉廢液，得到所要合成的多肽產物；