[發明專利]用于男性生育力診斷的試劑盒

有效

• 申請號: 201911090034.3
• 申請日: 2019-11-08
• 公開（公告）號: CN110760576B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 李俊;楊雪梅;劉元科;宋亞曼;劉芳
• 申請（專利權）人: 河北醫科大學第一醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/113
• 代理公司: 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901
• 代理人: 張海青

本發明公開了一種分子標記物miR?122,核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。還公開了一種用于男性生育力診斷試劑盒,用于測定精液中所述的分子標記物miR?122表達量的試劑，通過所述miR?122的表達量提示受精率和囊胚形成率。本發明通過檢測精液中miR?122的表達量，可以判斷受精、胚胎發育及臨床妊娠情況，為男性生育力判斷提供了一種簡便易操作，靈敏度高的方法，可作為評估男性生育能力的新指標。

技術領域

本發明涉及醫療檢測領域，特別是涉及一種用于男性生育力診斷的試劑盒。

背景技術

不育癥是一種特殊的生殖健康缺陷，常給家庭、社會造成嚴重影響。全世界不孕不育的發病率高達15％，在不孕不育患者中，單純男性因素導致的不育癥占20％，男女雙方因素占30-40％。準確判斷男性生育力是診斷不育及合理治療的前提。精子濃度、精液體積、精子總數、精子活力、精子形態等常規精液指標是評估男性生育力的“金標準”，但研究指出常規精液參數并不能準確反映男性生育狀態，約15％常規參數正常的患者患有不育癥。目前，不育癥評估缺乏分子診斷指標，因此，有必要尋找指示男性生育力的新指標。

發明內容

本發明的一個目的是解決至少上述問題，并提供至少后面將說明的優點。

本發明還有一個目的是提供一種分子標記物miR-122，通過該分子標記物的表達量，可判斷受精、胚胎發育及臨床妊娠情況。

本發明還有一個目的是提供一種用于男性生育力診斷的試劑盒，采用該試劑盒的試劑可檢測分子標記的表達量。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供一種分子標記物miR-122，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

優選的是，所述miR-122來源于精液。

本發明還提供一種用于男性生育力診斷的試劑盒,用于測定精液中所述的分子標記物miR-122表達量的試劑，通過所述miR-122的表達量提示受精率和囊胚形成率。

優選的是，所述試劑盒包括反轉錄體系、PCR反應體系和內參U6。

優選的是，所述反轉錄體系每25μL包含：5×pap/RT Buffer 5μL，RTase Mix 1μL，25U/μL PoLy A PoLymerase 1μL，模板RNA 18μL。

優選的是，反轉錄的反應條件為：37℃60min，85℃5min，將RNA反轉為cDNA。

優選的是，PCR擴增體系每20μL包括：2×qPCR Mix 10μL，通用引物2μL，正向引物2μL,50×ROX染料0.1μL，cDNA 2μL，ddH₂O 3.9μL。

優選的是，擴增條件為：95℃10min；95℃10sec，60℃30sec，45個循環。

本發明公開了以下技術效果：

本發明提供了一種分子標記miR-122，該分子標記miR-122來源于精液中，并且可以根據其表達量無創性評估受精能力、胚胎體外發育能力在內的男性生育力，為不育患者的早期發現、診斷和治療提供依據。

本發明公開的用于男性生育力診斷的試劑盒，具體以定量PCR為基礎，從精液中直接提取miR-122，檢測其表達量，用于結果評估，相比傳統精子活力和計數方法，本發明可以更快速和準確的評估男性生育力，有利于為男性生育力醫學實驗提供一種新的方法。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。