[發明專利]一種生物粘合劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201911087311.5
• 申請日: 2019-11-08
• 公開（公告）號: CN110665050B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 賴佳惠;周娟;陳敬華;方詩瑩;楊陳;王攀琛;曾以妍;張羲和
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: A61L24/10
• 分類號: A61L24/10;A61L24/00
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 仇鈺瑩

本發明公開了一種生物粘合劑及其制備方法，屬于生物粘合劑技術領域。該粘合劑是在氧化條件下由結構蛋白(膠原蛋白、明膠等)和單寧酸進行邁克爾加成反應，經過后續處理，再通過轉谷氨酰胺酶(TG)交聯制得。本發明提供的生物粘合劑所用的原料均具有良好的生物相容性，替代了傳統生物粘合劑中所用的有毒化學組分；同時，原料之間的協同作用可使本產品以凝膠狀態更長時間穩定地粘附于傷口處，并使單寧酸本身具有的抗菌和修復皮損傷的效果更持久地作用于傷口處，從而更好地促進傷口修復愈合；該生物粘合劑還能用注射器精準定位，能牢固粘連結合部位，具有重要的生物醫藥領域的應用價值。

技術領域

本發明涉及一種生物粘合劑及其制備方法，屬于生物粘合劑技術領域。

背景技術

傳統的外科手術縫合可以提供很好的抗張強度，以及相對較低的事故率等，但同時存在復雜費時、縫合對傷口造成二次機械損傷、產生細胞排斥免疫、體內殘留時間較長時會造成肉芽腫瘤、拆線會帶來一定的不適和痛苦等缺點。生物粘合劑是利用生物相容性優異的材料制備而成的無菌、無免疫原性且在一定的時間內能夠抑制細菌的生物醫學材料。其組分中無溶劑或者溶劑為水，在濕態環境下(即有水、組織液、血液等存在情況下)仍可與機體組織產生一定強度的粘接。生物粘合劑的溶出物等不對機體細胞產生毒性，不影響機體組織的傷口愈合，并且材料自身可降解，滿足使用要求后能夠被人體組織吸收，并最終被代謝出人體。

目前，臨床上常用的生物粘合劑有纖維蛋白粘合劑和貽貝粘蛋白粘合劑，但這些粘合劑仍存在很多缺陷。如纖維蛋白粘合劑存在著粘合強度低、制備時間長、價格昂貴的缺點以及潛在的病毒感染風險；貽貝粘蛋白粘合劑價格昂貴，美國售價達到115美元/mg。

因此，研究人員一直在研究這兩類生物粘合劑的替代品。近年來明膠基粘合劑成為一類重要的生物粘合劑，其粘合強度高，成本低，生物相容性好。如專利CN105879109A公開了一種價格低廉、粘合性強、適用于外科手術的生物粘合劑，該粘合劑由明膠水溶液和戊二醛水溶液混合生成。雖然該專利公開的粘合劑可以滿足粘附性和膠化時間的要求，但戊二醛易產生細胞毒性反應，用于患者創面極不安全，因此，達到理想要求的生物粘合劑仍未出現。

發明內容

本發明擬解決現有生物粘合劑價格高昂、生物相容性及可降解性不優良、無抗菌性等缺點，目的提供一種可注射型抗菌性生物粘合劑及其制備方法，本發明提供的生物粘合劑能用注射器精準定位，能牢固粘連結合部位，具有抗水性、抗菌性、封閉止血和無細胞毒性的特點，且該生物粘合劑及其降解產物都具有良好的生物相容性。

本發明的第一個目的是提供一種制備可注射型抗菌性生物粘合劑的方法，該方法包括以下步驟：

1)：在氧化條件下將結構蛋白和單寧酸進行邁克爾加成反應，得到單寧酸修飾的結構蛋白；

2)：將步驟1)制備的單寧酸修飾的結構蛋白溶于緩沖液中，加入轉谷氨酰胺酶，混合均勻后即得該生物粘合劑。

在一種實施方式中，所述緩沖液為Tris-HCl緩沖液。

在一種實施方式中，所述結構蛋白包括明膠或膠原蛋白。

在一種實施方式中，步驟1)中結構蛋白和去離子水質量比(w/w)為(0.005～0.1)：1，單寧酸和結構蛋白質量比(w/w)為(0.01～0.1)：1。

在一種實施方式中，步驟1)單寧酸和結構蛋白質量比(w/w)為(0.01～0.1)：1。

在一種實施方式中，步驟1)中邁克爾加成反應的過程具體為：將結構蛋白與去離子水混合，攪拌溶解，反應時間0.5～3.0h，調節溶液pH為堿性，pH＝8.0～9.0；加入單寧酸，持續攪拌并通氧氣進行反應，維持溶液pH與上述pH一致，于50～70℃反應1.0～4.0h，反應結束后把溶液pH調回中性偏堿性，pH＝7.0～7.8。