[發明專利]一種HPLC法測定血漿中氟尿嘧啶含量的方法

在審

• 申請號: 201911072147.0
• 申請日: 2019-11-05
• 公開（公告）號: CN110907564A
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發明（設計）人: 吳光彥
• 申請（專利權）人: 黑龍江福和制藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 王玉松;懷春穎

1.一種HPLC法測定血漿中氟脲嘧啶含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)對照品溶液的制備

將氟尿嘧啶用甲醇溶解，再用甲醇稀釋至每mL甲醇中含氟尿嘧啶0.1mg的溶液，作為對照品溶液；吸取1mL，用流動相稀釋至每mL含有氟尿嘧啶0.25μg；

(2)樣品預處理

取待測血漿，置于試管內，加入0.1mol/L磷酸氫二鈉水溶液，用磷酸調節pH至3.2，搖勻，加入萃取劑萃取，用于0.5mol/L磷酸氫二鈉水溶液調節pH至6-7，漩渦振搖2-5min，3000rpm離心5-15min，取上清液置于另一試管內，在加入萃取劑進行第二次萃取，漩渦振搖2-5min，3000rpm離心5-15min；取上清液，合并兩次上清液，于40-60℃下氮氣吹干，加入流動相定容，漩渦混勻，取上清液進樣；

(3)含量測定

利用高效液相色譜法進行含量測定。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相為0.1mol/L磷酸氫二鈉水溶液(磷酸調節pH至3.2)：乙腈＝90：10。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取劑是體積比為8：1：1的乙酸乙酯、乙腈和三乙胺的混合物。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的色譜條件為：

色譜柱：C₁₈色譜柱；

流動相：0.1mol/L磷酸氫二鈉水溶液(磷酸調節pH至3.2)：乙腈＝90：10；

檢測波長：265nm；

柱溫：45℃；

流速：1.0mL/min；

等度洗脫。

5.如權利要求3所述的方法，其特征在于，Kromacil C₁₈柱，4.6×250mm，5μm。

6.如權利要求3所述的方法，其特征在于，進樣量為10μL。

7.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述含量測定還包括先用流動相洗脫5-10min，然后再進行含量測定。