[發明專利]一種脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型的建立方法

有效

• 申請號: 201911069151.1
• 申請日: 2019-11-05
• 公開（公告）號: CN110558286B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 張琦;陳浩;劉志勇;侯吉華;劉利艷;萬強;王萬春;艾志福;項鳳梅;曾晶晶
• 申請（專利權）人: 江西中醫藥大學
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A23K50/50;A23K20/158;A23K20/20;A23K20/163
• 代理公司: 南昌青遠專利代理事務所(普通合伙) 36123
• 代理人: 劉愛芳

1.一種脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型的建立方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1:購買40~100只健康清潔級、體重180~220g的雄性SD品系大鼠；

S2：適應性喂養；

S21：對購買回的健康大鼠，先使用普通飼料+高脂飼料混合喂養1周；每天定時測量前一天同時刻所加飼料的剩余量，由飼料的剩余量計算消耗量，用消耗量除以食用該飼料的大鼠總體重，計算攝食量/每克體重；

S22:再以大于等于攝食量/每克體重為基準，使用高脂飼料適應性喂養1周；

S3:脾虛濕阻肥胖模型建立：將挑出的大鼠在22~28℃、空氣濕度40~50%的環境中，

A、在該喂養周期的前20~30天，按照如下方式喂養及鍛煉：若以喂養起始的第一天為單日、第二天為雙日、第三天為單日…至結束，以此類推，則：單日高脂飼料喂養，且以大于等于攝食量/每克體重作為施加飼料的標準；雙日禁食高脂飼料，并按照30g每只每天喂食低脂蛋白飼料；在該20~30天內每日鍛煉大鼠自由游泳達到耐力極限，然后持續用高脂飼料繼續喂養至8-11周；或者

B、以大于等于攝食量/每克體重作為施加飼料的標準，以高脂飼料自始喂養8-11周；在喂養周期的第1-21天，用冰糖水按每日2次每次2ml/只灌胃，同時鍛煉大鼠自由游泳達到耐力極限；

在上述兩種喂養周期8~11周結束后，分別測定每只大鼠單個體重，挑選出體重≥500g的大鼠；

挑選出的體重≥500g的大鼠按照下述指標評分判斷及選出造模成功的脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型，癥狀評分≥10分則造模成功；

造模篩選指標及癥狀評分：

a.行為：倦怠，無0分，有1分；扎堆，無0分，有1分；嗜臥無0分，有1分；動作緩慢，輕度緩慢1分，重度2分；

b.精神狀態：正常0分，萎靡1分，常瞇眼1分，反應遲鈍2分；

c.毛發、耳尾及肛門部：毛發耳尾肛門均正常0分，毛發稀疏1分，枯黃無光澤2分，耳尾血色淡1分；

d.排便：正常0分，大便稀溏、便軟不成形1分，瀉下如水樣2分；

e.造模五周后，正常0分，大鼠進食量少1分，體重增長緩慢或下降2分；

f.體溫下降，數字式醫用遠紅外熱成像儀觀察到動物遠紅外輻射的溫度變化一般1分，明顯2分；

g.舌體胖大質淡苔白滑，質正常淡紅無苔0分，淡紅有薄苔1分。

2.根據權利要求1所述的一種脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型的建立方法，其特征在于：在步驟S21中，先使用普通飼料+高脂飼料混合喂養1周期間，其中前三天是普通飼料和高脂飼料按3:1的質量比混合喂養，后四天是普通飼料和高脂飼料按2:1的質量比混合喂養。

3.根據權利要求1所述的一種脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型的建立方法，其特征在于：

每份普通飼料具體組成是：水分9.2%，粗蛋白19.98%，粗脂肪5.28%，粗灰分5.20%，粗纖維4.12%，無氮浸出物52.0%，鈣1.24%，磷0.92%，鈣：磷=1.35，賴氨酸1.34%，蛋氨酸＋胱氨酸0.72%，能量352kcal；

每份高脂飼料具體的組成是普通飼料88.9%，膽固醇1%，黃油10%，豬膽鹽0.1%；

每份低脂蛋白飼料具體組成是：水分9.2%，粗蛋白10%，粗脂肪5.28%，粗灰分5.20%，粗纖維4.12%，無氮浸出物52.0%，鈣1.24%，磷0.92%，鈣：磷=1.35，賴氨酸1.34%，蛋氨酸＋胱氨酸0.72%，余量為脂肪，能量352kcal；上述百分比組成均為質量百分比。

4.根據權利要求1所述的一種脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型的建立方法，其特征在于：在步驟S21中，將5~10只大鼠為一組進行喂養，一共準備5~8組；以攝食情況最好的一組大鼠為基礎計算攝食量/每克體重。

5.根據權利要求1所述的一種脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型的建立方法，其特征在于：在所述步驟S21中，攝食量/每克體重為1.0~1.5g飼料/g體重。

6.根據權利要求1所述的一種脾虛濕阻型單純性肥胖動物模型的建立方法，其特征在于，在所述步驟S3的A、B中，鍛煉大鼠自由游泳達到耐力極限是指：在水深20cm、水溫20±2℃的水槽中，每日1次，至大鼠游泳即將下沉即為耐力極限。