[發明專利]一種南藥植物古山龍的組培快繁方法

在審

• 申請號: 201911068988.4
• 申請日: 2019-11-05
• 公開（公告）號: CN110604062A
• 公開（公告）日: 2019-12-24
• 發明（設計）人: 莫昭展
• 申請（專利權）人: 玉林師范學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 44295 廣州海心聯合專利代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 王洪娟

本發明公開了一種南藥植物古山龍的組培快繁方法，包括依次進行的如下步驟：獲取古山龍的外植體、不定芽誘導培養、不定芽增殖培養、生根培養、移栽；所述的不定芽誘導培養操作的培養基包括：WPM培養基、2～2.5mg/L IBA、30mg/L腺嘌呤、20～30mg/L CH(水解酪蛋白)、30～40g/L蔗糖、3.5～4.5g/L瓊脂，pH為5.5～5.8。本發明d的誘導率達到了85％以上，移栽成活率達到了85％以上，實現了古山龍的組培快繁，從而實現了本發明的目的。

技術領域

本發明涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體來說是一種古山龍組培快繁方法。

背景技術

古山龍(Arcangelisia gusanlung H.S.Lo)防己科古山龍屬植物古山龍，以藤莖及根入藥，典型的苦、寒藥物，具清熱燥濕、解毒止痛之功，均含有小檗堿、巴馬汀等主要成分。為主產于海南、廣東、廣西、云南南部及部分東南亞國家，多自產自銷，是傣族、黎族等少數民族流傳至今的常用民間藥，是一種良好的退熱劑及抗炎劑，常用于流行性感冒的預防、急性黃疸型肝炎的治療等；現代研究表明其具有良好的抗炎，鎮痛，退熱，鎮咳，祛痰和止瀉作用；從古山龍中提取的脂多糖(LPS)免疫調節作用顯著。

目前，對于古山龍的研究主要集中在其藥效、毒理、化學成分等方面，人工繁殖及種植技術的相關研究未見報道。要想擴大人工種植，首要解決的問題就是優良種質的選育、繁育和栽培技術問題。因此建立古山龍的組培快繁方法顯得尤其重要。

發明內容

本發明的目的是提供一種南藥植物古山龍的組培快繁方法，選擇古山龍帶單芽莖段(帶頂芽或側芽，同時帶有葉的莖段)為外植體，經不定芽誘導培養、不定芽增殖培養、生根培養以及移栽等步驟，其誘導率達到了85％以上，移栽成活率達到了85％以上，實現了古山龍的組培快繁，從而實現了本發明的目的。

本發明提供的技術方案為：一種南藥植物古山龍的組培快繁方法，包括依次進行的如下步驟：獲取古山龍的外植體、不定芽誘導培養、不定芽增殖培養、生根培養、移栽；所述的不定芽誘導培養操作的培養基包括：WPM培養基、2～2.5mg/L IBA(吲哚丁酸)、30mg/L腺嘌呤、20～30mg/L CH(水解酪蛋白)、30～40g/L蔗糖、3.5～4.5g/L瓊脂，pH為5.5～5.8。

在上述的中藥古山龍的組培快繁方法中，所述的不定芽誘導培養操作的方法為：將采集得到的作為外植體的古山龍消毒后剪切成2.0～2.5cm的帶單個頂芽或側芽，同時帶一張葉的莖段并接種到誘導培養基中，置于25℃全黑暗培養40～50天即可誘導形成不定芽。

在上述的藥古山龍的組培快繁方法中，所述的不定芽增殖培養操作所用到的增殖培養基包括：WPM培養基、2～2.5mg/L ZT(玉米素)、2～2.5mg/L CTK(細胞分裂素)、30～40g/L蔗糖、3.5～4.5g/L瓊脂，pH為5.4～5.7。

在上述的中藥古山龍的組培快繁方法中，所述的不定芽增殖培養操作具體為：將不定芽誘導培養得到的不定芽切成長1.5～2.0cm的莖段并接種到增殖培養基中培養30～40天即可實現不定芽的增殖。

在上述的中藥古山龍的組培快繁方法中，所述的生根培養操作所用到的生根培養基包括：WS培養基、10～20mg/L CH(水解酪蛋白)、0.5～1.0mg/L ETH(乙烯)、20～30g/L蔗糖、3.5～4.5g/L瓊脂、，pH為5.4～5.8。

在上述的中藥古山龍的組培快繁方法中，所述的生根培養操作的方法為：從不定芽增殖培養得到增殖后的不定芽的基部切取2.0～3.0cm不定芽并接種到生根培養基中培養40～50天即能實現試管苗的生根。

在上述的中藥古山龍的組培快繁方法中，所述的移栽操作的具體方法為：將經生根培養操作得到的根系生長良好的試管苗在溫室大棚的自然光下煉苗10天，洗凈根部的培養基移栽于腐殖土中栽培成苗即得古山龍種苗。